Pbcheck covid 19 ag инструкция по применению на русском

Способ применения и дозы

Взятие и подготовка образцов

• Биологическим материалом для исследования является мазок из носоглотки человека. Исследованию подлежит как нативный носоглоточный мазок, так и мазок, помещенный в транспортную среду.

• Для взятия образца мазка из носоглотки осторожно введите тампон в ноздрю пациента, в которой визуально наблюдается большая секреция. Не касаясь тампоном дна носовой перегородки, осторожно протолкните тампон до задней части носоглотки. Проверните тампон несколько раз и затем выньте его из носоглотки.

• Образцы следует брать в стандартных лабораторных условиях.

• Образцы необходимо протестировать в кратчайшие сроки после взятия.

• Охлажденным или замороженным образцам перед тестированием необходимо дать нагреться до комнатной температуры (20? ~ 30?) и приобрести однородность.

• Использование транспортных сред (ВТС (вирусной транспортной среды) или УТС (универсальной транспортной среды)) может привести к снижению чувствительности теста из-за разбавления, поэтому настоятельно рекомендуется непосредственное тестирование мазка, взятого у пациента.

• В Российской Федерации взятие, транспортирование и хранение исследуемого материала осуществляется согласно МУ 4.2.2039-05 «Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории», утвержденным Роспотребнадзором, и Рекомендациям «Организация преаналитического этапа при централизации лабораторных исследований», одобренным профильной комиссией Минздрава России по клинической лабораторной диагностике 30.05.2013. При обращении анализируемого биологического материала и проведении исследований следует также руководствоваться Временными методическими рекомендациями Министерства здравоохранения РФ «Профилактика, диагностика и лечение новой коронавирусной инфекции COVID-19» в действующей версии.

Дополнительное оборудование и материалы, необходимые при работе с изделием, но не входящие в комплект поставки

1) Таймер.

2) Перчатки медицинские.

3) Тампоны для взятия носоглоточных мазков, например, Палочка-тампон с ватным намотом медицинская стерильная в упаковках 1 шт., 5 шт., 10 шт., 20 шт., 25 шт., 50 шт., 100 шт., 200 шт., 500 шт., 1000 шт. по ТУ 9398-012-44881728-2014 (РЗН 2015/2401).

4) Дозаторы со сменными одноразовыми наконечниками, обеспечивающие взятие жидкости в объеме 300 мкл (при необходимости).

5) Вирусная транспортная среда, например, Система транспортная со средой для вирусов, материал тампона нейлон «СТ со средой для вирусов-Н» (РЗН 2020/9961), производства ООО «ПОЛИГЕМ», Россия (при необходимости).

Процедура тестирования

• Собрать образцы в соответствии с инструкциями в разделе «Взятие и подготовка образцов».

• Тестовой кассете и образцу перед тестированием необходимо дать нагреться до комнатной температуры (20? ~ 30?).

• Вынуть тестовую кассету из индивидуального герметичного пакета непосредственно перед выполнением теста. Подписать кассету, указав имя пациента или контрольный идентификатор.

• Открыть реакционную пробирку с экстракционным буфером и снять крышку.

• Вставить тампон с мазком в реакционную пробирку с экстракционным буфером и провернуть тампон, прижав его к внутренней стенке пробирки, более пяти раз. В течение 15 секунд совершать тампоном движения вверх и вниз в экстракционном буфере, сжимая при этом пробирку с боков.

• Извлечь тампон, сжав стенки пробирки для извлечения максимального количества жидкости из тампона. Утилизировать тампон надлежащим образом.

• Плотно закрыть реакционную пробирку с экстракционным буфером и добавленным в нее образцом с помощью колпачка с фильтром и капельницей.

• Перевернуть реакционную пробирку и удерживать вертикально (на расстоянии примерно 2,5 см над лункой для образца на тестовой кассете). Удерживая пробирку за среднюю часть, следует слегка нажать на ее, чтобы выдавить две капли образца в соответствующую лунку на тестовой кассете.

• Через 10 минут необходимо визуально учесть результат. Если с момента нанесения образца прошло более 12 минут, результат теста становится некорректным и учету не подлежит.

* При проведении клинических испытаний на территории Российской Федерации для применения с набором реагентов валидированы тампоны для взятия назальных мазков Палочка-тампон с ватным намотом медицинская стерильная в упаковках 1 шт., 5 шт., 10 шт., 20 шт., 25 шт., 50 шт., 100 шт., 200 шт., 500 шт., 1000 шт. по ТУ 9398-012-44881728-2014 (РЗН 2015/2401).

Информация об использовании транспортной среды*

Если для тестирования с помощью «Экспресс-теста PBCheck COVID-19 Ag» требуется использовать ранее собранные образцы в транспортной среде, рекомендуется обеспечить минимальное разбавление образцов. Внесите ранее собранные образцы в транспортной среде в экстракционный буфер в соотношении один к одному (смешав по 300 мкл каждого из компонентов). Через 1 минуту закройте пробирку колпачком с дозатором и далее следуйте инструкции по выполнению процедуры тестирования.

* При проведении клинических испытаний на территории Российской Федерации для применения с набором реагентов валидирована вирусная транспортная среда – Система транспортная со средой для вирусов по ТУ 32.50.50-027-17547866-2020, Система транспортная со средой для вирусов, материал тампона нейлон «СТ со средой для вирусов-Н» (РЗН 2020/9961), производства ООО «ПОЛИГЕМ», Россия.

Интерпретация результатов

Отрицательный: единственная розовато-красная полоса на линии контроля (С) при отсутствии полосы на линии теста (Т) свидетельствует об отрицательном результате тестирования на вирус SARS-CoV-2. Отрицательный результат не указывает на полное отсутствие вируса SARS-CoV-2 в образце. Отрицательный результат говорит лишь о том, что содержание вируса SARS-CoV-2 в образце меньше предела обнаружения теста.

Положительный: наличие одновременно розовато-красной полосы на линии контроля (С) и розовато-красной полосы любой интенсивности на тестовой линии (Т) свидетельствует об обнаружении вируса SARS-CoV-2 в образце.

Недействительный: если на линии контроля (С) отсутствует цветная полоса, результат теста является недействительным. Такой результат теста не засчитывается, и тест необходимо повторить на новой тестовой кассете.

Если недействительный результат анализа (отсутствие красной полосы в зоне контроля С) повторяется после повторного проведения тестирования, обратитесь к уполномоченному представителю производителя на территории Российской Федерации.

Контроль качества

Наличие розовато-красной полосы в контрольной зоне служит для подтверждения того, что на тестовую кассету был нанесен требуемый объем тестируемого образца. Если эта полоса контроля отсутствует, результаты соответствующего теста являются недействительными, и тест необходимо выполнить повторно. Надлежащая лабораторная практика предусматривает организацию контроля качества для обеспечения правильной работы тестов. В набор реагентов в комплектации 1 входят тампоны с положительным и отрицательным контрольными мазками. COVID-19-положительный контрольный образец содержит нуклеопротеин SARS-CoV-2 в качестве антигена. Необходимо регулярно проводить тесты с положительным и отрицательным контрольным образцом. Если принятая в вашей лаборатории процедура контроля качества требует более частого использования контрольных образцов для верификации результатов тестов, следуйте установленной процедуре контроля качества.

Ограничения

• Данный тест предназначен только для профессиональной in vitro диагностики.

• Использование вирусной транспортной среды или универсальной транспортной среды может привести к снижению чувствительности теста из-за разбавления, поэтому настоятельно рекомендуется непосредственное тестирование мазка.

• Как и для других тестов, предназначенных для обнаружения антигенов, характеристики данного теста могут ухудшаться при анализе образцов, взятых через длительное время после проявления симптомов.

• Окончательный клинический диагноз не должен ставиться только на основании результатов данного теста. При диагностике заражения SARS-CoV-2 результаты данного теста следует использовать в сочетании с другими клиническими данными, такими как клинические признаки и симптомы, а также результатами других тестов. Подтверждение результатов теста должно производиться врачом с обязательным учетом клинических симптомов и результатов других лабораторных анализов.

• Данный тест обнаруживает как жизнеспособные (живые), так и нежизнеспособные вирусные частицы SARS-CoV-2. Результаты работы данного теста зависят от количества вирусных частиц (антигена) в образце и могут не коррелировать с результатами анализа вирусной культуры, выполненными на том же образце.

• Отрицательный результат теста может быть получен, если концентрация антигена в образце будет ниже предела обнаружения теста или если взятие или транспортировка образца производились с нарушениями требований.

• Нарушение процедуры тестирования может ухудшить характеристики теста и/или привести к некорректности результатов теста.

• Положительные результаты теста не исключают параллельное заражение другими патогенами.

• Отрицательные результаты для пациентов, у которых симптомы появились более чем за пять дней до тестирования, должны рассматриваться как предварительные, и в случае необходимости должен быть проведен молекулярный анализ.

Аналитические и эксплуатационные характеристики изделия

Предел обнаружения (Limit of detection, LoD)

Предел обнаружения теста PBCheck COVID-19 Ag определялся производителем с использованием последовательного разбавления термоинактивированного вируса SARS-CoV-2 (Zeptometrix, изолят: USA-WA1/2020). Использовался замороженный материал с концентрацией 1.51 x 10⁶ ЦПД₅₀/мл (TCID₅₀/ml).

Исследование по определению предела обнаружения теста PBCheck COVID-19 Ag было спроектировано с учетом непосредственного использования образцов мазков без их разбавления. В образец мазка из носоглотки добавлялось примерно 50 мкл физиологического раствора, содержащего вирусные частицы. Затем этот образец мазка из носоглотки вводился в реакционную пробирку с экстракционным буфером в соответствии с методикой проведения теста.

Тест состоял из двух этапов определения предела обнаружения:

1) Предварительная оценка предела обнаружения

Готовили последовательные 10-кратные разведения термоинактивированного вируса, которые затем тестировали в 5 повторах.

В итоге 5 из 5 положительных результатов было получено для концентрации 1.51 x 10³ ЦПД₅₀/мл. Затем была выполнено последовательное 2-кратное разбавление с определением предела обнаружения.

2) Подтверждение предела обнаружения

Тестировалась концентрация 1.51 x 10³ ЦПД₅₀/мл. Двадцать (20) из двадцати (20) результатов оказались положительными. На основе этого анализа было установлено, что предел обнаружения составляет 1.51 x 10³ ЦПД₅₀/мл.

При проведении клинических испытаний на территории Российской Федерации с использованием музейного штамма коронавируса SARS-CoV-2 «ГК2020/1» из коллекции ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» подтвержден заявленный производителем предел обнаружения – 1.51 x 10³ ЦПД₅₀/мл (1.51 ? 10⁶ копий/мл).

Перекрестная реактивность

Перекрестная реактивность теста PBCheck COVID-19 Ag оценивалась производителем путем тестирования образцов различных микроорганизмов или вирусов. Каждый микроорганизм и вирус тестировался в трех повторах в отсутствие (отрицательный результат теста) или в присутствии (положительный результат теста) термоинактивированного вируса SARS-CoV-2 с титром 3.78 x 10³ ЦПД₅₀/мл.

* Тестирование проводилось в трех повторах.

По данным клинических испытаний, проведенных на территории Российской Федерации, при использовании набора реагентов перекрестная реактивность отсутствует со следующими возбудителями инфекционных болезней человека в указанной концентрации:

№	Наименование возбудителя	Концентрация
1	Вирус гриппа А А/Москва/7/2020 (H1N1) pdm09	1:64 ГАЕ*
2	Аденовирус 5 типа 394	105 TCID50/ml*
3	Респираторно-синцитиальный вирус «hRSV-1»	105 TCID50/ml*
4	Метапневмовирус человека НМ-1	1:32 ГАЕ*
5	Haemophilus influenzae АТСС® 49766™, Microbiologics®, США**	1?105 КОЕ/мл
6	Streptococcus pneumoniae, АТСС® 49619™, Microbiologics®, США**	1?105 КОЕ/мл
7	Escherichia coli ATCC® 8739™, Microbiologics®, США**	1?105 КОЕ/мл
8	Вирус парагриппа 3 типа (human Parainfluenza virus)	Клинический образец
9	Коронавирусы NL-63, 229E, HKU-1, OC 43 (human Coronavirus)	Клинический образец
10	Бокавирус (human Bocavirus)	Клинический образец
11	Риновирус	Клинический образец
12	Аденовирус	Клинический образец

* при использовании инактивированных музейных штаммов из панели инактивированных возбудителей респираторных инфекций для исследования аналитической специфичности, ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи», в разведении 1:100 от указанной концентрации;

** коллекционные штаммы микроорганизмов.

Исследование потенциальной интерференции

Вещества, обладающие потенциальной перекрестной реактивностью, тестировались в отсутствие (отрицательный результат теста) или в присутствии (положительный результат теста) термоинактивированного вируса SARS-CoV-2 с титром 3.78 x 10³ ЦПД₅₀/мл. Эти вещества при указанных концентрациях не влияли на аналитические характеристики теста PBCheck COVID-19 Ag. Присутствие следующих веществ не вызывало появление ложноположительных или ложноотрицательных результатов:

Растворитель	Вещество	Конечная концентрация	Отрицательный результат*	Положительный результат*
ДМСО	Ацетаминофен	10 мг/мл	ОТРИЦ.	ПОЛОЖ.
Билирубин	15 мг/мл	ОТРИЦ.	ПОЛОЖ.
Фосфатно-солевой буфер pH 7.2	Тобрамицин	51.4 мкМ	ОТРИЦ.	ПОЛОЖ.
Метанол	Дексаметазон	1.53 мкМ	ОТРИЦ.	ПОЛОЖ.
Дист. вода	Осельтамивир	5 мг/мл	ОТРИЦ.	ПОЛОЖ.
Альбумин из сыворотки крови человека	50 мг/мл	ОТРИЦ.	ПОЛОЖ.
Глюкоза	1.2 мг/мл	ОТРИЦ.	ПОЛОЖ.
NaOH	Муцин	1 мг/мл	ОТРИЦ.	ПОЛОЖ.
Этанол	Бензокаин	1 мг/мл	ОТРИЦ.	ПОЛОЖ.
Фосфатно-солевой буфер pH 7.2	Цельная кровь	1 %	ОТРИЦ.	ПОЛОЖ.

* Тестирование проводилось в трех повторах.

По данным клинических испытаний, проведенных на территории Российской Федерации, при использовании набора реагентов отсутствует интерферирующее влияние следующих веществ в указанной концентрации:

Интерферирующее вещество	Концентрация
Занамивир	5 мг/мл
Фенилэфрин	10 мг/мл
Олопатадин	100 мкг/мл
Тобрамицин	130 мкг/мл
Оксиметазолин	15% (об./об.)
Будесонид	15% (об./об.)
Водный раствор рапы (озерной соли) 0,9%	10% (об./об.)
Гемоглобин (цельная кровь)	5% (об./об.)
Муцин	5% (об./об.)

Эффект высокой дозы («хук»-эффект)

Максимальная доступная концентрация термоинактивированного SARS-CoV-2 (1.51 x 10⁵ ЦПД₅₀ /мл) подверглась тестированию. Эффект высокой дозы не наблюдался.

При проведении клинических испытаний на территории Российской Федерации с использованием музейного штамма коронавируса SARS-CoV-2 «ГК2020/1» из коллекции ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» продемонстрировано отсутствие «хук»-эффекта при концентрации вируса в концентрации –1 ? 10⁴ ЦПД₅₀/мл (TCID₅₀/ml) (1 ? 10⁷ копий/мл).

Характеристики клинической эффективности

Исследование клинических характеристик

Клинические характеристики Экспресс-теста PBCheck COVID-19 Ag определялись производителем в рамках исследования ста двадцати (120) замороженных образцов мазков из носоглотки в транспортной среде, для которых ранее было установлено наличие или отсутствие вирусных частиц.

Экспресс-тест PBCheck COVID-19 Ag продемонстрировал процент совпадения положительных результатов (PPA) 90.0% и процент совпадения отрицательных результатов (NPA) 97.5% с использованием одобренного EUA ПЦР теста в реальном времени в качестве эталонной методики.

• Процент совпадений положительных результатов (PPA, %) = (36/40) ? 100 = 90.0% (95% дов. интервал по Уилсону: 77.0-96.0).

• Процент совпадений отрицательных результатов (NPA, %) = (78/80) ? 100 = 97.5% (95% дов. интервал по Уилсону: 91.3-99.3).

По итогам исследования процента положительных совпадений результаты проведенного тестирования затем оценивались по значениям порогового цикла (Ct) ПЦР в реальном времени:

Вспомогательное исследование характеристик

Из-за ограниченного количества неразбавленных образцов в мазки из носоглотки вносили термоинактивированный вирус для симуляции прямой процедуры тестирования мазков и оценки характеристик теста. В тридцать образцов мазков из носоглотки было введено примерно по 50 мкл раствора вирусных частиц. В каждые десять (10) образцов добавляли вирус в количестве 1xLoD (1.51 x 10³ ЦПД₅₀/мл), 2xLoD (3.02 x 10³ ЦПД₅₀/мл) и 3xLoD (4.53 x 10³ ЦПД₅₀/мл). Образцы с добавленным вирусом вносили в реакционную пробирку с экстракционным буфером из набора реагентов «Экспресс-тест PBCheck COVID-19 Ag», и параллельно эта же операция выполнялась для тридцати образцов мазков из носоглотки, взятых у тридцати различных пациентов. Также были протестированы тридцать (30) мазков из носоглотки от тридцати различных пациентов с отрицательным результатом. В нижеследующей таблице представлены результаты этого исследования:

Тип образца	Количество образцов	Количество положительных / количество исследованных
Отрицательный	30	0/30
1xLoD	10	10/10
2xLoD	10	10/10
3xLoD	10	10/10

• Процент совпадений положительных результатов (PPA, %) = (30/30) ? 100 = 100% (95% дов. интервал по Уилсону: 88.6-100).

• Процент совпадений отрицательных результатов (NPA, %) = (30/30) ? 100 = 100% (95% дов. интервал по Уилсону: 88.6-100).

Диагностические характеристики

По данным клинических испытаний набора реагентов, проведенных на территории Российской Федерации с использованием 35 положительных и 35 отрицательных клинических образцов биологического материала (мазков из носоглотки), были установлены следующие диагностические характеристики:

Диагностическая чувствительность: 92,11% (95% ДИ 78,62-98,34%).

Диагностическая специфичность: 100,00% (95% ДИ 90,00-100,00%).

ПЦР, Ct (ген N, ORF1ab)	Количество образцов	Количество положительных результатов при применении ИИ, абс. (%)	ДИ 95%
18 ? Ct ? 24	20	20 (100,00)	83,16-100,00
24 <Ct ?24,83	15	12 (83,33)	58,58-96,42

Экспресс-тест COVID-19 Ag разработана с целью выявления антигена вируса SARS-CoV-2 в мазках из носоглотки посредством визуальной оценки цветного проявления на внутренней пластинке. Определение основано на принципе высокоспецифичных иммунохимических реакциях между антигенами и антителами.

Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа Кассета содержит:
1. Конъюгатную колодку: анти-SARS-CoV-2 антитела, меченый коллоидным золотом и специфическим маркером;
2. Полоса нитроцеллюлозной мембраны, на которой расположены линии (Т)-тестовая линия и (С)-линия контроля качества сенсибилизирована моноклональными антителами, направленными  против высококонсервативного нуклеопротеинового антигена SARS-CoV и SARS-CoV-2.
Когда образец попадает к лунке испытательного устройства, он движется вперед вдоль тестового устройства, растворимый коньюгат перемещается с образцом и вступают в контакт с анти-SARS, адсорбированным на нитроцеллюлозной полоске. Если образец  содержит SARS-CoV-2, комплекс коньюгат-SARS-CoV 2 останется связанным с антителом anti- SARS-CoV 2, иммобилизованным на нитроцеллюлозной мембране. Результат виден в течение 15 минут в виде бордовой линии, которая проявляется на полосе. Раствор продолжает перемещаться навстречу контрольному реактиву, который связывает контрольный конъюгат, тем самым образуя вторую бордовую линию.
Если линия Т не отражает цвет, это свидетельствует об отрицательном результате. Тестовое устройство также содержит контрольную линию C, линию качества, есть тестовая линия или нет, линия контроля качества C должна быть бордовой. Результат теста недействительный, если линия контроля качества C не отражает цвет, этот образец нужно повторно проверить.
Назначение медицинского изделия
для диагностики in vitro, в том числе:
Тест предназначен для обнаружения антигена вируса SARS-CoV-2 в образцах мазков из носоглотки методом иммунохроматографического анализа.
Только для диагностики in vitro и может быть использован при тестировании на месте оказания медицинской помощи, в амбулаториях и центральных лабораториях, по месту нахождения пациента. 

Срок хранения: 24 месяца. Не использовать по истечению срока годности
Условия хранения: Тест следует хранить в его оригинальной упаковке в запечатанном виде при комнатной температуре или в охлаждаемом помещении (+2-30°C) Не замораживать!

Транспортирование экспресс тестов производиться, согласно ГОСТ 17768, при температуре от 2 до 30 °С. Замораживание при транспортировании не допускается.

Не использовать по истечении срока годности, указанного на упаковке. Не использовать тест при повреждении саше из фольги. Не использовать тест повторно.
Во избежание перекрёстного заражения образцов следует использовать    новый контейнер при заборе каждого образца.
Необходимо тщательно ознакомиться со всей процедурой до проведения тестов.
Все образцы должны рассматриваться как потенциально опасные. Следует соблюдать соответствующие меры предосторожности по обеспечению микробиологической безопасности на протяжении всей процедуры и следовать стандартным процедурам по надлежащей утилизации образцов.
Вирусные транспортные среды (VTM) могут повлиять на результат теста. Нельзя исследовать материал, собранный для ПЦР исследовании.

Все образцы должны рассматриваться как потенциально опасные. Следует соблюдать соответствующие меры предосторожности по обеспечению микробиологической безопасности на протяжении всей процедуры и следовать стандартным процедурам по надлежащей утилизации образцов

Перед использованием необходимо позволить тест кассетам, образцам и/или средствам контроля достичь комнатной температуры (+15-30°C).
—Достаньте тест-кассету из запечатанной упаковки и положите ее на чистую и ровную поверхность. Наклейте ярлык с именем пациента или контрольным идентификационным номером. Для получения более надежного результата анализ необходимо провести в течение одного часа.
— Поместить флакон для экстракции с биоматериалом в штатив;
— Суспендировать пробу энергичным встряхиванием флакона;
— внести 3 капли (приблизительно 100 мкл) тестируемой суспензии в окошко для внесения пробы (S).
— Включить таймер;
— Через 15 мин. визуально оценить результат реакции.
Дождитесь появления красной(ых) полоски(сок). Результат считывается через 10 минут. Не учитывайте результат, полученный через 20 минут.

Интенсивность окрашивания в тестовой зоне (Т) может варьироваться в зависимости от концентрации целевых веществ, присутствующих в образце. Следовательно, любой оттенок цвета в тестовой зоне следует рассматривать как положительный результат.
Недостаточный объем образца, неправильно проведенная процедура тестирования или использование просроченных тест — кассет являются наиболее вероятными причинами отсутствия контрольной полоски

Нет перекрестных реакций  с Arcanobacterium,candida albicans, pseudomonas aeruginosa, staphylococcus aureus, staphylococcus epidermidis, staphylococcus pneumonia, streptococcus pneumonia, Streptococcus pyogenes, кишечная палочка и.др

Экспресс-тест для обнаружения антигена вируса SARS-CoV-2 в мазках из носоглотки «COVID-19 Ag»
предназначен исключительно для профессиональной диагностики в лабораторных условиях и должен использоваться только в целях качественного выявления антигена COVID-19 Ag;
Как и при всех других диагностических тестах, все результаты должны интерпретироваться вместе с другой клинической информацией, имеющейся в распоряжении врача;
Если тест дал отрицательный результат, а клинические симптомы не   проходят, рекомендуется провести дополнительное тестирование с помощью других клинических методов.

— Тест-кассеты в герметичной упаковке с влагопоглотителем-25шт;
— Флакон — дозатор с буферным раствором для экстракции-25шт;
— Тампон- 25 шт.
— Штатив- 1шт;
— Инструкция по медицинскому применению