Электростимулятор хэс 1 инструкция по применению скачать

02.07.202115.04.2021

Электростимулятор хэс 1 мион 01 инструкция | Main page

※ Download: renmoosico.fastdownloadportal.ru?dl&keyword=%d1%8d%d0%bb%d0%b5%d0%ba%d1%82%d1%80%d0%be%d1%81%d1%82%d0%b8%d0%bc%d1%83%d0%bb%d1%8f%d1%82%d0%be%d1%80+%d1%85%d1%8d%d1%81+1+%d0%bc%d0%b8%d0%be%d0%bd+01+%d0%b8%d0%bd%d1%81%d1%82%d1%80%d1%83%d0%ba%d1%86%d0%b8%d1%8f&source=bandcamp.com

Наличие документов Знак Наличие документов означает, что компания загрузила свидетельство о государственной регистрации для подтверждения своего юридического статуса компании или физического лица-предпринимателя. Для получения сигнала заполнения, близкого по форме к меандру, используется зеркало токов на транзисторах. Запрещается накладывать и изменять место наложения электродов при включенном электростимуляторе.

Трансформатор Т1 наматывается на броневом сердечнике Б3. Схема крепления электродов во время тренировок показана на рисунке ниже.

Схема стимулятора низкочастотными электрическими токами. В последнее время в продаже появились так называемые МИО- стимуляторы, предназначенные для воздействия низкочастотными электрическими токами на мускулатуру и периферическую нервную систему человека. МИО- стимуляторы применяются с целью: — увеличения массы мышц; — снижения толщины жировой прослойки, активизируя гормональную регуляцию и обменные процессы во всем организме. Электростимуляция мышц с помощью электростимулятора, действительно, является довольно эффективной. При электростимуляции достигается быстрый прирост мышечной массы и более широкий охват мышечных групп по сравнению с обычной тренировкой. Возможно также проведение избирательной электростимуляции наиболее важных мышц в режиме максимальных сокращений с последующими расслаблениями. Множество других предложений с ценой и фото. Электростимулятор Мион-1 для физиотеапевтического лечения. Портативный одноканальный стимулятор нервно-мышечного аппарата ХЭС-1 ‘МИОН-01’ предназначен для физиотерапевтического воздействия импульсами модулированными токами в оздоровительной. Если судить по тонусу твердости мышц, то во время электростимуляции они развивают напряжение, превышающее максимальное произвольное: тонометр показывает 1. Использование прерывистого режима электростимуляции например, 1. Это усиливает окислительные процессы и повышает устойчивость мышцы к утомлению. Кроме того, увеличивается содержание гликогена в мышце. В элек- тростимулированной мышце содержание молочной кислоты она вызывает чувство мышечной боли после интенсивных нагрузок не увеличивается совсем или же возрастает незначительно, в то время как работа такой же интенсивности вызывает в мышце другой конечности нестимулированной резкое увеличение содержания этого вещества. Таким образом, электростимуляция предотвращает накопление молочной кислоты. В электростимулированных мышцах повышаются анаэробные и аэробные окисления. Электростимуляция вызывает увеличение уровня кальция, натрия, железа и миоглобина, который передает кислород непосредственно работающим тканям и депонирует его в мышце. В нестимулированных мышцах утомительная работа вызывает значительный распад АТФ. При такой же нагрузке в предварительно элек- тростимулированной мышце распад АТФ незначителен, т. У лиц с имплантированным кардиостимулятором электростимуляция может вызвать нарушение его работы. В очень редких случаях имеется индивидуальная непереносимость электрических импульсов повышенная чувствительность кожи. Поиск товаров и услуг. В наличииЭлектростимулятор ХЭС-1 ‘МИОН-01’. Портативный одноканальный стимулятор нервно-мышечного аппарата предназначен для физиотерапевтического воздействия низкочастотными токами на мускулатуру и периферическую нервную систему человека в оздоровительной и. Удобно иметь две пленки с программами для роста мышц и для уменьшения жировых отложений параметры см. У меня именно инструкция от электростимулятора ХЭС-1 ‘МИОН-01’ каким образом я могу передать вам копию инструкции? Заранее говорю вам что все набрать на ‘Клаве’ я не смогу-слишком много. Принципиальная электрическая схема МИО- стимулятора приведена на рис. Электростимулятор состоит из следующих элементов: генератора стимулирующих импульсов — DD1. Частота следования импульсов определяется конден сатором С1 и цепочкой. Фронт импульса формируется цепочкой R1. Срез импульса формируется цепочкой С2, VD3, R1. Генератор модуляции собран по традиционной схеме и отдельного описания не требует. Длительность импульса модуляции определяется временем разряда конденсатора СЗ через резисторы R1. Цепочкой формируется экспоненциальный фронт и срез импульса модуляции. Полный сигнал снимается с эмиттера. Для получения сигнала заполнения, близкого по форме к меандру, используется зеркало токов на транзисторах. При этом частота генератора импульсов определяется напряжением, снимаемым с R1′. Амплитуда выходного сигнала определяется напряжением, снимаемым с движка R2′. I При этом частота импульсов определяется так же, как и в режиме непрерывной генерации. Максимальная амплитуда выходного сигнала определяется напряжением, снимаемым с движка переменного резистора R2′, который включен в цепь VT5, R1. Так как на эмиттере VT5 присутствует сигнал модуляции, то выходной сигнал будет изменяться в соответствии с ним. При этом амплитуда выходного сигнала определяется также, как и в режиме непрерывной генерации. Мгновенная частота импульсов определяется мгновенным напряжением, снимаемым с движка R1′, который включен в цепь VT5 — R2. То есть изменение частоты прямопропорционально изменению напряжения на эмиттере VT5. Выходные стимулирующие импулосы СИ представляют собой регулируемые по амплитуде и частоте заполнения симметричные биполярные импульсы, модулированные по трапецеидальному закону с экспоненциальной формой фронта и среза. Форма СИ представлена на рис. Стимулятор обеспечивает работу в следующих режимах рис. За ; режим амплитудной модуляции рис. Форма стимулирующих импульсов: Рис. Формы стимулирующих импульсов при различных режимах работы. Аи — амплитуда СИ. Т — период следования импульсов заполне ния. Г — период следования СИ t. СИ tc — длительность среза СИ. Все постоянные резисторы — МЛТ- 0,1. Конденсаторы С1, С2, С5, С6 — КМ- 5; СЗ, С4, С7 — К5. Трансформатор Т1 наматывается на броневом сердечнике Б3. Обмотки Н1- К1 и Н2- К2 содержат по 8. Обмотка НЗ- КЗ- 4. Подготовка стимулятора к работе. При этом должен светиться индикатор питания HL3, ритмично загораться индикатор модуляции HL2, синхронно ему должна отклоняться вправо стрелка индикатора уровня задания выходного напряжения. Если индикаторы не светятся более 1. Электроды располагают в области средней трети стимулируемой мышцы. На крупных мышцах целесообразно, чтобы расстояние между электродами составляло 4.. Электроды фиксируются на теле резиновым или другим эластичным бинтом, если позволяют условия, то и массой тела. Зоны наложения электродов приведены на рис. Прямая мышца живота верхняя часть 5. Прямая мышца живота нижняя часть 6. Рекомендуемая последовательность стимуляции групп мышц рис. Частота следования импульсов 3. ГЦ, частота стимуляции 0,2. Оптимальные положения ручек этих регулировок устанавливают, руководствуясь наименьшими дискомфортными ощущениями при электростимуляции. Волевым напряжением мышцы- антагониста например, трицепса, если стимулируется бицепс, и наоборот стараются не допустить движения в суставе. При этом дополнительно тренируется еще и мышца- антагонист, что повышает эффективность электростимуляции. Жжение или другие неприятные ощущения в области наложения электродов в большинстве случаев свидетельствуют о недостаточном контакте электродов с кожей. При этом необходимо выключить стимулятор, протереть кожу в этих местах тампоном, смоченным раствором поваренной соли и обеспечить плотное прилегание электродов к телу с помощью эластичного бинта. Электростимуляция с целью увеличения работоспособности. Электростимуляция мышц перед значительными физическими нагрузками например, интенсивной спортивной тренировкой, утомительной работой создает благоприятные условия для сохранения и увеличения энергетических резервов мышц и всего организма. С этой целью выполняется стимуляция основных групп мышц: бедренных, ягодичных, мышц живота рис. Гц, частота заполнения 6.. Гц, частота стимуляции 0,2.. Амплитуда выходного сигнала- до сокращения мышц без движения в суставах. Длительность стимуляции одной мышцы — 5.. Электростимуляция при излишнем весе. Электростимуляция позволяет снизить толщину жировой прослойки, активизируя гормональную регуляцию и обменные процессы во всем ор. С этой целью выполняют стимуляцию больших групп мышц ягодичные, брюшного пресса, зоны 4, 5, 6,1. С учетом наибольшего отложения подкожно- жировой клетчатки на животе стимулируют зоны 4, 5, 6 рис. Уровень выхода- до сильного и максимально переносимого сокращения мышц, но безболезненного. Обязательно соблюдение разгрузочной диеты. Запрещается накладывать и изменять место наложения электродов при включенном электростимуляторе. Во избежание выхода стимулятора из строя запрещается замыкание выходных гнезд и электродов между собой. Описанный МИО- стимулятор показал хорошую повторяемость, простоту в обращении и положительный результат электростимуляции. Электроды для электростимуляции представляют собой пластины из электропроводящего полимера марки 5. При отсутствии полимера 5. Размеры электродов — 2. При эксплуатации электродов из свинцовых пластин под них необходимо класть прокладку из мягкой ткани бязь, фланель , смоченную раствором поваренной соли. Автор статьи — А. Статья опубликована в РЛ, Номер 5..

Таким образом, электростимуляция предотвращает накопление молочной кислоты. Ключевое слово не электростимулятор, а миостимулятор стимулятор мышц. А также болезней ЖКТ, органов дыхания, органов кровообращения. Использование прерывистого режима электростимуляции например, 1. Продам Электростимулятор ХЭС — 1 Мион — 01. Частота следования импульсов определяется конден сатором С1 и цепочкой. Кое какие рисунки есть. К электронному блоку можно подключать разнообразные насадки более 3. Продам Электростимулятор ХЭС — 1 Мион — 01. Разобраться в потоке импульсов нервный узел не может и останавливает рефлекс. Аи — амплитуда СИ.

Электростимулятор ХЭС-1 «МИОН-01»

инструкция на электростимулятор хэс 1

инструкция на электростимулятор хэс 1

описание документа по английски	инструкция на электростимулятор хэс 1
классификатор государственных стандартов	инструкция на электростимулятор хэс 1
номер	инструкция на электростимулятор хэс 1
общероссийский классификатор	инструкция на электростимулятор хэс 1
дата начала действия норматива	инструкция на электростимулятор хэс 1
описание документа	инструкция на электростимулятор хэс 1
дата отмены норматива	инструкция на электростимулятор хэс 1

иные с

скачать la2off	скачать la2off
loreal preference инструкция	loreal preference инструкция
mazda marvie руководство	mazda marvie руководство
new home new star ns 3d инструкция	new home new star ns 3d инструкция
инструкция supra stv 2085	инструкция supra stv 2085
sony cdx f5500 распиновка	sony cdx f5500 распиновка
wm12s468me инструкция	wm12s468me инструкция
стинол mg 320	стинол mg 320
тридуктал	тридуктал
хатсан ат 4410	хатсан ат 4410
руководство по эксплуатации автомобиля toyota corolla runx	руководство по эксплуатации автомобиля toyota corolla runx
инструкция уневерсалный контролер ur 12	инструкция уневерсалный контролер ur 12
инструкция по ремонту саи200	инструкция по ремонту саи200
meteo logik pro 977	meteo logik pro 977
инструкция на magicar m 8000	инструкция на magicar m 8000

Все госты

Сайт управляется системой uCoz

Электростимулятор хэс 1 мион 01 инструкция по эксплуатации and cleo анимации для samp zip

▶▷▶▷ схема измерителя артериального давления иад 1

▶▷▶▷ схема измерителя артериального давления иад 1

Интерфейс	Русский/Английский
Тип лицензия	Free
Кол-во просмотров	257
Кол-во загрузок	132 раз
Обновление:	25-05-2019

схема измерителя артериального давления иад 1 — Электроника ИАД-1 Википедия ruwikipediaorg wikiЭлектроника Cached Вместо этого он снабжён резиновой грушей, как у обычного ручного тонометра Измерение артериального давления прибором Электроника ИАД — 1 производится так же, как ручным тонометром Руководство по эксплуатации — Измеритель артериального wwwtwirpxcomfile1034932 Cached Руководство по эксплуатации — Измеритель артериального давления Электроника ИАД — 1 Файл формата pdf размером 4,65 МБ Схема Измерителя Артериального Давления Иад 1 — Image Results More Схема Измерителя Артериального Давления Иад 1 images Принципиальная схема измерителя артериального давления ИАД-1 electro-technarodrumedicaldiagnosticiad- 1 htm Cached Принципиальная схема измерителя артериального давления (тонометра) ИАД — 1 Электростимулятор Хэс-1 Мион-01 Инструкция — gdturbabit gdturbabitweeblycomblogelektrostimulyator-hes- 1 -mion Cached Схема стимулятора низкочастотными электрическими токами В последнее время в продаже появились так называемые МИО- стимуляторы, предназначенные для воздействия низкочастотными электрическими токами на Схемы (circuits), сервисные инструкции (service manual electro-technarodruschematicsmedicaldiagnostichtm Cached Принципиальная схема измерителя артериального давления ИАД-1 артериального давления ГОСТ 28703-90 Приборы автоматические и полуавтоматические для docscntdrudocument1200022600 Cached Проверку полосы пропускания и АЧХ (пп4, 5, 6 табл 1 ) канала измерения давления проводят согласно структурной схеме, представленной на черт 1 в соответствии с техническими условиями на ИАД Измеритель артериального давления ВР А1 Easy автомат wwwyoutubecom watch?vKkkM 1 xlEP9o Cached Измеритель артериального давления ВР А1 Easy автомат Microlife Как избавиться от повышенного давления Автоматический измеритель артериального давления Gamma Модель wwwyoutubecom watch?v-htQqMyYOiA Cached Автоматический измеритель артериального давления Gamma Модель SMART Аптечная сеть 9- 1 — 1 Loading Измеритель артериального давления и частоты пульса BP A2 Easy bwellmedtechprorunetcat_files119198 BP A2 Easy 1 EN Display Dear Customer, Your new Microlife blood pressure monitor is a reliable medical device for taking measurements on the upper arm It is simple to use, accurate and comes highly recommended for blood pressure monitoring in your home This device was developed in collabora-tion with physicians and clinical tests carried out Измеритель артериального давления и частоты пульса BP A2 Basic bwellmedtechprorunetcat_files119198 BP A2 Basic 1 EN Display Dear Customer, Your new Microlife blood pressure monitor is a reliable medical device for taking measurements on the upper arm It is simple to use, accurate and comes highly recommended for blood pressure monitoring in your home This device was developed in collabora- Promotional Results For You Free Download Mozilla Firefox Web Browser wwwmozillaorg Download Firefox — the faster, smarter, easier way to browse the web and all of 1 2 3 4 5 Next 228

• Электронная схема тонометра выполнена на пяти кремниевых транзисторах типа КТ315 Б, выполняющих обра
• ботку сигнала с датчика, и одной микросхеме К176ЛА7, осуществляющей генерацию акустических сигналов.
  
  Для того чтобы измерить кровяное давление при помощи прибора, манжету стоит одеть на плечо, на 1-2
• 
  Для того чтобы измерить кровяное давление при помощи прибора, манжету стоит одеть на плечо, на 1-2 см выше локтевого изгиба, закрепить ее и запустить аппарат. Для удобства на всех манжетах есть схема использования.
  
  …запросы рынка и является разработчиком новейших технологий, без применения которых не выходит ни один новый продукт Aamp;D. Aamp;D — уникальная компания, специализирующаяся на разработке высокотехнологических медицинских измерителей артериального давления…
  
  Аптеки 1 Здоровый Город. Схема проезда. Скидка 15 на автоматический измеритель артериального давления Little Doctor LD 30. Измерение давления.
  
  Принципиальную схему рефрактометра, фотоколориметра, спектрофотометра, газожидкостной хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии; Нормативный срок, общая трудоемкость освоения ООП (в зачетных единицах) и соответствующая квалификация (степень) приведены в таблице 1 .
  
  Бесплатно полный текст ГОСТ Р 51959.1-2002 Сфигмоманометры (измерители артериального давления) неинвазивные. Часть 1. Общие требования. Размеры ГОСТ 14857-76 Схемы защиты от опасных напряжений и токов, возникающих на линиях проводного вещания.
  
  Приборы для измерения давления и температуры — манометры, термометры, разделители и электронные датчики-преобразователи, приборы в искробезопасном исполнении. Продукция, промышленность, сервис.
  
  Айсмонтас Б.Б. Педагогическая психология: Схемы и тесты. М.: Изд-во ВЛАДОС-ПРЕСС, 2002.-208с. Компоненты процедуры наблюдения:1) Определение задачи, цели.
  
  Интернет-аптека Столица-Медикл продает Аппарат дизмер. давления AND автомат UA-888 1 шт. Эй энд Ди Кампани Лтд.. Мы предлагаем купить Аппарат дизмер. давления AND автомат UA-888 1…
  
  Внешние мешающие шумы, пониженное давление, а также слабый тонус кровеносных сосудов значительно затрудняли прослушивание пульса обычным стетоскопом, особенно если он невысокого качества.

манжету стоит одеть на плечо

спектрофотометра

• сервисные инструкции (service manual electro-technarodruschematicsmedicaldiagnostichtm Cached Принципиальная схема измерителя артериального давления ИАД-1 артериального давления ГОСТ 28703-90 Приборы автоматические и полуавтоматические для docscntdrudocument1200022600 Cached Проверку полосы пропускания и АЧХ (пп4
• как у обычного ручного тонометра Измерение артериального давления прибором Электроника ИАД — 1 производится так же
• accurate and comes highly recommended for blood pressure monitoring in your home This device was developed in collabora- Promotional Results For You Free Download Mozilla Firefox Web Browser wwwmozillaorg Download Firefox — the faster

Request limit reached by ad sasXML

Электронная схема тонометра выполнена на пяти кремниевых транзисторах типа КТ315 Б, выполняющих обработку сигнала с датчика, и одной микросхеме К176ЛА7, осуществляющей генерацию акустических сигналов.

Для того чтобы измерить кровяное давление при помощи прибора, манжету стоит одеть на плечо, на 1-2 см выше локтевого изгиба, закрепить ее и запустить аппарат. Для удобства на всех манжетах есть схема использования.

…запросы рынка и является разработчиком новейших технологий, без применения которых не выходит ни один новый продукт Aamp;D. Aamp;D — уникальная компания, специализирующаяся на разработке высокотехнологических медицинских измерителей артериального давления…

Аптеки 1 Здоровый Город. Схема проезда. Скидка 15 на автоматический измеритель артериального давления Little Doctor LD 30. Измерение давления.

Принципиальную схему рефрактометра, фотоколориметра, спектрофотометра, газожидкостной хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии; Нормативный срок, общая трудоемкость освоения ООП (в зачетных единицах) и соответствующая квалификация (степень) приведены в таблице 1 .

Бесплатно полный текст ГОСТ Р 51959.1-2002 Сфигмоманометры (измерители артериального давления) неинвазивные. Часть 1. Общие требования. Размеры ГОСТ 14857-76 Схемы защиты от опасных напряжений и токов, возникающих на линиях проводного вещания.

Приборы для измерения давления и температуры — манометры, термометры, разделители и электронные датчики-преобразователи, приборы в искробезопасном исполнении. Продукция, промышленность, сервис.

Айсмонтас Б.Б. Педагогическая психология: Схемы и тесты. М.: Изд-во ВЛАДОС-ПРЕСС, 2002.-208с. Компоненты процедуры наблюдения:1) Определение задачи, цели.

Интернет-аптека Столица-Медикл продает Аппарат дизмер. давления AND автомат UA-888 1 шт. Эй энд Ди Кампани Лтд.. Мы предлагаем купить Аппарат дизмер. давления AND автомат UA-888 1…

Внешние мешающие шумы, пониженное давление, а также слабый тонус кровеносных сосудов значительно затрудняли прослушивание пульса обычным стетоскопом, особенно если он невысокого качества.

электростимулятор инструкция применения электростимулятор хэс 1

дата начала действия норматива	электростимулятор инструкция применения электростимулятор хэс 1
оглавление документа	электростимулятор инструкция применения электростимулятор хэс 1
общероссийский классификатор	электростимулятор инструкция применения электростимулятор хэс 1
номер	электростимулятор инструкция применения электростимулятор хэс 1
оглавление документа английское	электростимулятор инструкция применения электростимулятор хэс 1
дата окончания действия документа	электростимулятор инструкция применения электростимулятор хэс 1
классификатор	электростимулятор инструкция применения электростимулятор хэс 1
электронная инструкция по ремонту и эксплуатации луаз	электронная инструкция по ремонту и эксплуатации луаз
электромобиль peg perego инструкция по ремонту	электромобиль peg perego инструкция по ремонту
электротехника пускатели пбр руководство по эксплуатации	электротехника пускатели пбр руководство по эксплуатации
электронное руководство соболь крайслер	электронное руководство соболь крайслер
электролюкс стиральная машина ewt 13720 инструкция	электролюкс стиральная машина ewt 13720 инструкция
электронная инструкция по ремонту lancer хучбек	электронная инструкция по ремонту lancer хучбек
электронная справочная система по сервису руководство по ремонту а4	электронная справочная система по сервису руководство по ремонту а4
электронная книга qumo relax инструкция	электронная книга qumo relax инструкция
электролюкс посудамаечная машина руководство по эксплуатации	электролюкс посудамаечная машина руководство по эксплуатации
электромеханический замок cisa 11931 60 2 инструкция	электромеханический замок cisa 11931 60 2 инструкция
электрообогреватели масленные инструкция	электрообогреватели масленные инструкция
электронная почта инструкция безопасность	электронная почта инструкция безопасность
энрофлоксацин100 инструкция	энрофлоксацин100 инструкция
электрокардиограф cardio care ekg 2000 bionet корея инструкция к аппарату	электрокардиограф cardio care ekg 2000 bionet корея инструкция к аппарату
электронныое руководство по ремонту ваз 2114	электронныое руководство по ремонту ваз 2114
электронный уровень фестул инструкция	электронный уровень фестул инструкция
электронная справочная система по сервису руководство по ремонту а4	электронная справочная система по сервису руководство по ремонту а4

электронная книжка sony 600 инструкция

код ОКС—электронная книжка sony 600 инструкция
дата начала стандарта электронная книжка sony 600 инструкция

наименование документа по английски—электронная книжка sony 600 инструкция

название в базе-электронная книжка sony 600 инструкция

классификатор стандартов электронная книжка sony 600 инструкция

оглавление документа-электронная книжка sony 600 инструкция

эхолот piranhamax 30 инструкция пользователя скачать бесплатно	эхолот piranhamax 30 инструкция пользователя скачать бесплатно
эреспал в сиропе для детей 3лет инструкция	эреспал в сиропе для детей 3лет инструкция
электромонтер по ремонту и обслуживанию электрооборудования почтовой связиая инструкция	электромонтер по ремонту и обслуживанию электрооборудования почтовой связиая инструкция
электроплитка индукционная energy 914 инструкция	электроплитка индукционная energy 914 инструкция
эндодонтический наконечник morita инструкция по применению	эндодонтический наконечник morita инструкция по применению
энвижн групп руководство компании	энвижн групп руководство компании
эрегатор инструкция	эрегатор инструкция
электроштабелер emc e инструкция по технике безопасности	электроштабелер emc e инструкция по технике безопасности
электронный словарь bookman китай инструкция	электронный словарь bookman китай инструкция
эхолот fishfinder 340c качественная инструкция на русском языке	эхолот fishfinder 340c качественная инструкция на русском языке
эталон а079 инструкция	эталон а079 инструкция
электроплита hansa 5100 инструкция	электроплита hansa 5100 инструкция
эпу unitra g 602 hi fi руководство по эксплуатации	эпу unitra g 602 hi fi руководство по эксплуатации
электромонтер по строительству линейно кабельных сооружений должностная инструкция	электромонтер по строительству линейно кабельных сооружений должностная инструкция
электронные весы лидер в торговле руководство по эксплуатации	электронные весы лидер в торговле руководство по эксплуатации
электроконвектор напольный инструкция	электроконвектор напольный инструкция

Электростимуляция может улучшить рабочую память | Исследователь мозга Brink

BU показывает, что электростимуляция может восстановить рабочую память 70-летнего человека до 20-летнего

.

Когда вы читаете слова на этой странице, ваш мозг делает что-то великолепное. Каждое предложение на мгновение задерживается в вашей голове, буквы сливаются в симфонию нейронных сигналов. Эти сложные электрические ритмы образуют язык мозга, язык, который мы начали понимать только в прошлом веке.

Роб Рейнхарт, доцент кафедры психологии и наук о мозге в Бостонском университете, говорит, что мы достигли точки, когда мы не только понимаем этот язык, но и можем говорить на нем и использовать его для улучшения работы разума. В новаторском исследовании, опубликованном в апреле 2019 года в журнале Nature Neuroscience , Рейнхарт и доктор наук Джон Нгуен демонстрируют, что электростимуляция может улучшить рабочую память людей в возрасте 70 лет, так что их производительность при выполнении задач памяти неотличима от результатов 20-летних. .

Исследование Рейнхарта и Нгуена нацелено на рабочую память — ту часть разума, где живет сознание, ту часть, которая активна всякий раз, когда мы принимаем решения, рассуждаем, вспоминаем наши списки продуктов и (надеюсь) помним, где мы оставили свои ключи. Рейнхарт объясняет, что рабочая память начинает ухудшаться в возрасте от 20 до 30 лет, поскольку определенные области мозга постепенно теряют связь и теряют координацию. К тому времени, когда нам исполняется 60–70 лет, эти нейронные цепи настолько ухудшились, что многие из нас испытывают заметные когнитивные трудности даже при отсутствии таких деменций, как болезнь Альцгеймера.

Роб Рейнхарт. Фото Сидни Скотта

Но дуэт обнаружил нечто невероятное: используя электрические токи для неинвазивной стимуляции областей мозга, которые потеряли свой ритм, мы можем значительно улучшить производительность рабочей памяти.

В ходе исследования, которое было поддержано грантом Национального института здравоохранения, они попросили группу людей в возрасте от 20 до 60 лет и группу в возрасте от 60 до 70 лет выполнить серию задач по запоминанию, которые требовали от них просмотра изображения, а затем , после короткой паузы, чтобы определить, отличалось ли второе изображение немного от оригинала.

Изначально молодые люди были намного точнее в этом, значительно превосходя старшую группу. Однако, когда пожилые люди получили 25-минутную мягкую стимуляцию, проводимую через электроды кожи головы и персонализированную для их индивидуальных мозговых цепей, разница между двумя группами исчезла. Еще больше обнадеживает? Это улучшение памяти продолжалось, по крайней мере, до конца 50-минутного временного окна после стимуляции — точки, на которой эксперимент закончился.

Чтобы понять, почему этот метод настолько эффективен, нам нужно взглянуть на два механизма, которые позволяют рабочей памяти функционировать должным образом: соединение и синхронизация.

Связь возникает, когда различные типы мозговых ритмов координируются друг с другом, и помогает нам обрабатывать и сохранять рабочие воспоминания. Медленные, низкочастотные ритмы — тета-ритмы — танцуют перед вашим мозгом, действуя как дирижеры оркестра. Они возвращаются к более быстрым высокочастотным ритмам, называемым гамма-ритмами, которые генерируются в той области мозга, которая обрабатывает окружающий нас мир.

Подобно тому, как музыкальный оркестр состоит из флейт, гобоев и скрипок, каждый из гамма-ритмов, находящихся в вашем мозгу, вносит что-то уникальное в основанный на электричестве оркестр, который создает ваши воспоминания.Например, один гамма-ритм может обрабатывать цвет объекта, который вы держите в уме, другой — его форму, третий — ориентацию, а третий — звук.

Но когда дирижеры возятся с дубинками — когда тета-ритмы теряют способность связываться с этими гамма-ритмами, чтобы контролировать их, поддерживать их и наставлять, — мелодии в мозгу начинают распадаться, и наши воспоминания теряют свою остроту.

Между тем, синхронизация — когда тета-ритмы из разных областей мозга синхронизируются друг с другом — позволяет отдельным областям мозга общаться друг с другом.Этот процесс служит связующим звеном для воспоминаний, объединяя отдельные сенсорные детали для создания одного связного воспоминания. С возрастом наши тета-ритмы становятся менее синхронизированными, и ткань наших воспоминаний начинает изнашиваться.

Работа Рейнхарта и Нгуена предполагает, что, используя электрическую стимуляцию, мы можем восстановить эти пути, которые имеют тенденцию сбиваться с пути с возрастом, улучшая нашу способность вспоминать наш опыт, восстанавливая поток информации в мозгу. И не только пожилые люди могут извлечь выгоду из этого метода: он перспективен и для молодых людей.

В исследовании 14 молодых взрослых участников плохо справлялись с заданиями на память, несмотря на их возраст, поэтому он перезвонил им, чтобы тоже стимулировать их мозг.

«Мы показали, что плохие исполнители, которые были намного моложе, в возрасте 20 лет, также могли получить пользу от такого же рода стимуляции», — говорит Рейнхарт. «Мы могли бы улучшить их рабочую память, даже если им не было за 60 или 70».

Взаимосвязь и синхронизация, добавляет он, существуют в виде континуума: «Это не значит, что есть люди, которые не состоят в паре, против людей, которые состоят в паре.”

С одной стороны, человек с невероятной памятью может отлично справляться как с синхронизацией, так и с взаимодействием, тогда как человек с болезнью Альцгеймера, вероятно, будет бороться с обоими. Другие находятся между этими двумя крайностями — например, вы можете быть слабым соединителем, но сильным синхронизатором, или наоборот.

И когда мы используем эту стимуляцию для изменения нейронных симфоний, мы не просто вносим незначительные изменения, подчеркивает Рейнхарт. «Это имеет отношение к поведению.Теперь [люди] по-другому выполняют задачи, они лучше запоминают, лучше воспринимают, быстрее учатся. Это действительно необычно ».

Забегая вперед, он предвидит множество будущих приложений для своей работы.

«Это открывает совершенно новые возможности для исследований и лечения, — говорит он, — и мы очень рады этому».

Рейнхарт хотел бы изучить влияние электростимуляции на отдельные клетки мозга, применив ее к моделям на животных, и ему любопытно, как повторяющиеся дозы стимуляции могут еще больше улучшить мозговые цепи у людей.Но больше всего он надеется, что его открытие однажды приведет к лечению миллионов людей во всем мире, страдающих когнитивными нарушениями, особенно с болезнью Альцгеймера.

Он любит свою работу в качестве нейробиолога, особенно когда она приводит к прорывам, подобным этому. «Это дико», — добавляет он с улыбкой в ​​голосе. «Это дико думать, что мы можем воздействовать на электричество в мозговых цепях так же, как мы нацелены на химический нейротрансмиттер в мозгу.”

Изучите связанные темы:

JCM | Бесплатный полнотекстовый | Стимуляция дифференцировки остеобластов человека в магнитно-механически активируемых сетях из ферромагнитных волокон

1. Введение

Давно признано, что факторы, управляющие изменениями в костной структуре вокруг протезных имплантатов, чувствительны к сигналам микросреды, состоящим из комбинаторных биохимических и механических стимулов [ 1,2]. Широко принятая концепция ремоделирования кости, вызванного механической стимуляцией [3,4,5], в значительной степени формирует основу для режимов реабилитации и физиотерапевтических упражнений, применяемых после имплантации костного имплантата.Литература, посвященная пониманию того, как механические стимулы (напряжение сдвига потока жидкости, гидростатическое давление и деформация, вызванная индуцированными напряжениями / деформациями) преобразуется в биохимические сигналы, а затем интегрируется в клеточные реакции, обширна. Клеточные ответы были объяснены различными моделями механотрансдукции, включая опосредованные интегрином адгезии и ионные каналы, активируемые стрессом [6,7,8]. В таблице 1 перечислены недавние исследования клеточной механотрансдукции как средства стимулирования остеогенеза путем изучения изменений клеточной передачи сигналов и уровней белков, которые, как известно, необходимы для остеогенной дифференцировки и функционального созревания.Хотя эффекты различаются и их трудно сравнивать из-за различных экспериментальных установок / условий, исследования демонстрируют, что механическая нагрузка является сильным регулятором биологии и функции костей. Однако примеров «активных» имплантируемых биомедицинских устройств, которые явно включают механическую стимуляцию в качестве неотъемлемой части своей конструкции, было немного. Покрытие имплантата / каркас, сделанный из взаимосвязанных сетей тонких ферромагнитных волокон, спеченных вместе в точках пересечения. , был разработан для стимулирования роста здоровой перипротезной кости [9,10].Дизайн основан на хорошо известных теориях физиологии скелета и концепциях моделирования и ремоделирования костей с регулируемым напряжением [3,4,5]. Согласно этим теориям, процессы ремоделирования и гомеостаза костей регулируются в соответствии с пороговыми напряжениями, выше и ниже которых соответствующие регулирующие механизмы включаются и выключаются. Эта концепция отличается от идеи прямой стимуляции роста костей с помощью внешнего магнитного поля (импульсные электромагнитные поля (см. Обзор [11]) или статических магнитных полей, например.г., [12,13]). Это также отличается от идеи использования магнитных полей для создания сил внутри клеток, прикрепленных к ферромагнитным шарикам микро- или наноразмеров (например, [14,15,16,17,18,19]). внешнее магнитное поле, оно упруго деформируется, поскольку ферромагнитные волокна стремятся выровняться в направлении поля, создавая напряжения в растущей костной ткани (рис. 1а). Из-за анизотропии формы длинные волокна легче намагничиваются вдоль их длинной оси, так как размагничивающее поле в этом направлении незначительно.Для оценки деформаций, вызванных в сети ферромагнитных волокон приложением магнитного поля, была разработана аналитическая магнитомеханическая модель [9,10]. Важным (контролируемым) параметром конструкции является соотношение сторон сегмента волокна (сечения между суставами L по диаметру волокна D), поскольку напряжение, которое волокна могут передавать в растущую кость, зависит от того, насколько волокна способны отклонить. Для сетей из металлических волокон с относительно низкой объемной долей волокна и тонкими сегментами волокон между стыками макроскопический магнитомеханический отклик таких материалов можно предсказать с помощью аффинной модели [9,10], основанной на отклонении отдельных сегментов волокна, подвергающихся магнитному воздействию. -индуцированный изгибающий момент.Конструкция протеза, позволяющая использовать такой эффект, будет включать проксимальный по окружности пористый слой, содержащий ферромагнитные волокна, прикрепленные к обычному немагнитному стержню [20]. Лечение будет включать воздействие магнитного поля ниже, чем используемое для диагностических целей (например, МРТ) вскоре после операции имплантата, что является критическим периодом для прорастания костной ткани. Ферритные нержавеющие стали являются сильными кандидатами для этого применения, поскольку они показывают относительно высокие магнитные поля. индукции.Одна потенциальная марка ферритной нержавеющей стали — 444; сталь с очень низким содержанием углерода и азота и небольшим количеством прочных карбидных элементов, таких как Nb и Ti, для улучшения коррозионной стойкости [21,22]. Было обнаружено, что 444 [23] вызывает сопоставимые клеточные ответы in vitro с точки зрения остеогенеза, токсичности и воспалительной реакции на 316L в краткосрочной культуре.

Это исследование рассматривает гипотезу о том, что на реакцию клеток может влиять индукция магнитомеханической деформации через сеть из ферромагнитных волокон.Здесь мы впервые показываем, что этот тип срабатывания увеличивает производство матрикса, минерализацию и экспрессию остеогенных генов и белков в человеческих остеобластах, культивируемых на ферромагнитных волоконных сетях.

2. Экспериментальная часть

2.1. Подложки — волоконно-оптические сети

В этом исследовании использовались два типа твердотельных спеченных волоконных сетей из нержавеющей стали, изготовленных из ферритной нержавеющей стали 444 (Nikko Techno Ltd., Токио, Япония) и аустенитной нержавеющей стали 316L (Bekaert SA, Zwevegem, Бельгия). с содержанием волокон ~ 15 об.% (табл. 2).444 сети были изготовлены путем стрижки волокон 60 мкм со свернутой в спираль металлической фольги толщиной 100 мкм, что привело к прямоугольной форме поперечного сечения. Сети 316L были изготовлены из пучков волокон с шестиугольным поперечным сечением. Длина диагонали поперечного сечения волокна составляла около 40 мкм. Подробности изготовления этих сетей описаны в [40,41]. Информация о сетях 444 и 316L представлена ​​в Таблице 2 [41,42]. Хотя объемные доли волокна и распределение ориентации волокна очень похожи между двумя сетями, как показано в таблице 2, существуют различия в форме и размере поперечного сечения волокна.Поскольку сети 444 состоят из более грубых волокон (60 × 100 мкм, ² ), они имеют меньше волокон на единицу площади и, следовательно, больше межволоконных пространств по сравнению с сетями из 316L с той же объемной долей волокна, сделанной из более тонких волокна (длина диагонали 40 мкм, длина стороны 20 мкм). Из-за этих различий сети 316L были включены в исследование в качестве контрольной, а не экспериментальной группы. Для всех экспериментов использовались листы толщиной ~ 1 мм. Для экспериментов по срабатыванию магнитного возбуждения с засеянными ячейками образцы были вырезаны в форме замочной скважины (рис. 2а) с использованием специального штамповочного пресса.Образцы имели диаметр 9 мм и прямоугольное сечение захвата (2,3 × 3,0 мм ² ). Их подвергали ультразвуковой очистке в течение 15 минут последовательно в ацетоне, этаноле и сверхчистой воде, сушили на воздухе при комнатной температуре с последующей стерилизацией при 126 ° C в течение 20 минут с использованием автоклава Prestige Medical ™ Classic. Для экспериментов по магнитному отклонению образцы прямоугольной балки с размерами 40 мм (L) × 10 мм (w) × 1 мм (t) были вырезаны с помощью электроэрозионной обработки.

2.2. Культура клеток и посев

Остеобласты плода человека (fHOb), полученные из Европейской коллекции клеточных культур (406-05f, ECACC), были отобраны для исследований на культуре клеток.Клетки поддерживали в среде Маккоя 5A (Gibco ™, 16600082) с добавлением инактивированного нагреванием 10% FBS (Invitrogen, 10108-157) и 1% антибиотика-антимикотика (Gibco ™, 15240062) и 50 мг · мл ^-1 Фосфат-магниевая соль L-аскорбиновой кислоты (FUJIFILM Wako Chemical Corporation, 013-19641). Раствор трипсин-ЭДТА (Sigma, T4049) использовали для отделения клеток для их пассирования и посева. fHObs из третьего пассажа использовались для всех экспериментов. Перед посевом стерилизованные сети предварительно увлажняли путем погружения в культуральную среду.Затем сетки помещали на стерильные гидрофобные мембраны из ПТФЭ (политетра-фторэтилена) с размером пор 5 мкм (Fisher Scientific, 10676741). Каплю клеточной среды объемом 75 мкл, содержащую 7,5 × 10 ⁴ клеток, помещали поверх каждой сети, а затем сети инкубировали в течение 4 часов при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO ₂ для прикрепления клеток. . По истечении этого периода каждую сеть переносили в лунку 24-луночного планшета, залитую 1 мл культуральной среды.Чтобы вызвать дифференцировку, через 2 дня в культуральную среду добавляли 10 нМ дексаметазона (Sigma, D2915) и 10 мМ β-глицерофосфата (Fisherscientific, 10424701) в соответствии с предыдущей работой [43]. Среду пополняли через день.

2.3. Клеточная адгезия и организация цитоскелета

Образцы фиксировали 4% (мас. / Об.) Параформальдегидом (Sigma – Aldrich, Haverhill, UK, 252549) в течение 15 минут при комнатной температуре, проницаемостью 0,1% Triton X-100 (Sigma, T878). ) и 0.1% TWEEN-20 (Sigma – Aldrich, Haverhill, UK, P6585) в течение 15 минут и инкубируют с 1% (мас. / Об.) Бычьим сывороточным альбумином (BSA) в фосфатно-солевом буфере (PBS) при 37 ° C в течение 10 минут. чтобы заблокировать неспецифическое связывание. Актиновый цитоскелет визуализировали с использованием меченного FITC фаллоидина (1: 100) (Sigma, P5282) с последующим окрашиванием клеточных ядер антифадным средством Vectashield, содержащим 4,6-диамидино-2-фенилиндол (DAPI), (Sigma, F6057). Флуоресцентные изображения получали с использованием флуоресцентного микроскопа Zeiss Axio-Obsorber.Z1.

2.4. Минерализация клеток

2.4.1. OsteoImage

^TM Mineralization Assay

Минерализация оценивалась с помощью OsteoImage ^TM Mineralization Assay (Lonza, PA-1503) в соответствии с инструкциями производителя. Этот анализ основан на специфическом связывании флуоресцентного окрашивающего реагента с костными минералами, отложенными клетками. Вкратце, клетки фиксировали 4% формальдегидом в PBS в течение 30 минут при комнатной температуре и окрашивали окрашивающим реагентом (1: 100 в буфере для разбавления окрашивающего реагента) в течение 30 минут в защищенном от света месте.Образцы промывали промывочным буфером и устанавливали с помощью DAPI. Гидроксиапатит костных узелков определяли качественно с помощью флуоресцентного микроскопа Zeiss Axio-Obsorber.Z1 и количественно с помощью программного обеспечения ImageJ (7 изображений для образца, 3 образца на группу, Национальные институты здравоохранения, Мэриленд, США).

2.4.2. Окрашивание ализарином красным

Окрашивание ализарином красным (Sigma – Aldrich, Haverhill, UK, A5533) использовали для визуализации отложения кальция, указывающего на минерализацию клеток через 16 и 21 день для всех магнитных и статических групп.Вкратце, образцы промывали PBS и фиксировали в 4% (об. / Об.) Формальдегиде при комнатной температуре в течение 30 минут. После промывания избытком дистиллированной воды (dH ₂ O) раствор ализарина красного (2% мас. / Об. В dH ₂ O, доведенный до pH 4,2 с помощью 0,5% гидроксида аммония) использовали для покрытия образцов в течение 30 минут. После аспирации не включенного красителя образцы тщательно промывали dH ₂ O. Образцы визуализировали с использованием флуоресцентного микроскопа Zeiss Axio-Obsorber.Z1 (эмиссия флуоресценции 580 нм).Для оценки относительных уровней минерализации матрикса краситель ализариновый красный экстрагировали из образцов (3 образца на группу) путем добавления 800 мкл 10% уксусной кислоты с последующей 30-минутной инкубацией при комнатной температуре, как описано ранее [44]. Поглощение при 405 нм солюбилизированного красителя ализаринового красного из образцов измеряли с использованием планшет-ридера FLUOstar ^® Omega (BMG Labtech Ltd., Эйлсбери, Великобритания). Стандартная кривая окрашивания ализарином красным была построена с известной концентрацией красителя.

2,5. Анализ экспрессии генов

На 21 день культивирования общую РНК экстрагировали из засеянных клетками каркасов с использованием RNeasy Protect Mini Kit (Qiagen, Manchester, UK, 74124) в соответствии с инструкциями производителя. Комплементарная дезоксирибонуклеиновая кислота (кДНК) была синтезирована методом обратной транскриптазно-полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) с использованием наборов для обратной транскрипции QuantiTect ^® (Qiagen, 205311) в соответствии с инструкциями производителя. ОТ-ПЦР проводили с использованием набора QuantiFast SYBR Green PCR Kit (Qiagen, 204056) со следующими праймерами: глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа (GAPDH), костный морфогенетический белок 2 (BMP-2), коллаген типа 1α1 (COL1A1), щелочной фосфатаза (ALP), остеокальцин (OCN), связанный с runt фактор транскрипции 2 (Runx2) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), которые усиливают транскрипты, характерные для остеобластов.Праймеры были получены от Qiagen и восстановлены в соответствии с инструкциями производителя. Условия цикла были выполнены с этапом активации 5 мин при 95 ° C, за которым следовали 40 циклов по 10 с при денатурации 95 ° C и 30 мин при этапе удлинения 60 ° C. Выражение GAPDH служило внутренним контролем. Относительную экспрессию рассчитывали с использованием метода 2 ^-ΔΔCT по Ливаку и Шмитгену [45]. Результаты были представлены в виде кратного изменения выражения, нормализованного к их не задействованным аналогам, чтобы определить эффект магнитомеханического воздействия.

2,6. Высвобождение белка

BMP-2 человека (Sigma-Aldrich, Haverhill, UK, RAB0028-1KT) и человеческий остеокальцин (Sigma-Aldrich, Haverhill, UK, RAB1073-1KT) использовали в соответствии с инструкциями производителя для количественного измерения выбранных белки в супернатантах клеточных культур. Вкратце, среды для культивирования клеток удаляли через 21 день, переносили пипеткой в ​​полипропиленовые пробирки Эппендорфа и хранили при -80 ° C до анализа в иммуноферментном анализе (ELISA). Антитела, использованные в этом анализе, были специфичными для человеческого BMP-2 и OCN и были нанесены на предоставленный 96-луночный планшет.Стандарты и образцы из волоконных сетей были перенесены в лунки, и BMP-2 / OCN, присутствующий в образце, был связан с лунками иммобилизованным антителом. Лунки промывали и добавляли биотинилированное антитело против BMP-2 человека или OCN. После смывания несвязавшегося биотинилированного антитела в лунки пипеткой вносили стрептавидин, конъюгированный с HRP. Лунки снова промывали, в лунки добавляли раствор субстрата TMB и цвет проявлялся пропорционально количеству связанных BMP-2 и OCN.Стоп-раствор менял цвет с синего на желтый, и интенсивность цвета измеряли как оптическую плотность с использованием планшет-ридера FLUOstar ^® Omega (BMG Labtech Ltd., Эйлсбери, Великобритания) при 450 нм. С помощью стандартной кривой определяли содержание белка и устанавливали по отношению к соответствующим контролям.

2.7. Магнитомеханический привод

2.7.1. Магнитомеханическое срабатывание оптоволоконных сетей с засеянными ячейками

Эксперименты по срабатыванию ячеек проводили с использованием 1.Электромагнит с катушкой постоянного тока 6 Тесла с однородной рабочей областью 75 × 75 × 75 мм ³ , разработан Hirst Magnetic Instruments Ltd. (Корнуолл, Великобритания). Катушки возбуждения питались от источника питания мощностью 11 кВт 30 В / 500 А с внутренним главным выключателем из трех модулей по 40 А каждый. Инкубационная камера OKO-lab по индивидуальному заказу была предоставлена ​​Indigo Scientific Ltd. (Хертс, Болдок, Великобритания). Система представляла собой инкубатор CO ₂ с электрическим подогревом, оборудованный контроллерами температуры, газа и влажности.Уровни CO ₂ внутри камеры поддерживались на уровне 5% за счет продувки смесью медицинского газа 5% CO ₂ / воздух.

Планшеты для культивирования клеток. Изготовленные на заказ планшеты для культивирования клеток из полистирола получали микромеханической обработкой (Protolabs, Телфорд, Великобритания). Схематическое изображение пластин показано на рис. 2б, в. На рис. 2b показаны крышка и дно чашек для культивирования, сделанных на заказ. Крышка содержала язычки (отмечены красным, рисунок 2c), которые использовались для захвата прямоугольной части образцов замочной скважины, в то время как круглая область образцов замочной скважины (рисунок 2a) могла свободно деформироваться во время процесса срабатывания.Образцы располагались в канавках (рис. 2c — синий) на средней высоте лунки, обеспечивая внутрискважинное пространство для среднего потока и облегчая работу с образцами. В углу пластины была введена смещенная прокладка, чтобы обеспечить зазор 0,5 мм для циркуляции воздуха, когда основание пластины закрыто крышкой. Циркуляция воздуха позволила уравновесить скважинную среду газовой фазой (увлажненная атмосфера 5% CO ₂ /95% воздух). В процессе приведения в действие температура поддерживалась на уровне 37 ° C.Это было подтверждено измерением in situ температуры среды в лунках, содержащих задействованные сетчатые волокна, а также температуры воздуха над планшетами для культивирования клеток из полистирола.

Протокол активации: Все эксперименты по активации включали статическое культивирование в течение 7 дней (чтобы позволить клеткам колонизировать межволоконные пространства) с последующим ежедневным срабатыванием в течение 5 часов (что эквивалентно 3600 циклам в день) в течение 14 дней. Магнитное поле изменялось синусоидально от 0,3 до 1,1 тесла с частотой 0,2 Гц. Во всех исследованиях реакция 444 сетей с магнито-механическим приводом (444_M) была нормализована по сравнению с контрольными образцами (444 сети без срабатывания, 444_S).Чтобы исследовать любое прямое воздействие магнитного поля на ячейки, сети 316L (немагнитные) подвергались тем же протоколам срабатывания (316L_M) и сравнивались с образцами 316L без срабатывания (316L_S).

2.7.2. Отклонение магнито-механической сети

Образцы прямоугольной балки приводились в действие магнитомеханическим способом с помощью катушки-электромагнита 0,7 Тесла. Установка включала две катушки с водяным охлаждением, которые питались отдельно от источника постоянного тока 60 В-20 А. Образцы помещали между полюсными наконечниками магнита так, чтобы их длинная ось была параллельна приложенному магнитному полю, и удерживали в механическом зажимном устройстве, закрепленном на одном конце (дополнительный раздел, рисунок S4).Напряженность поля ступенчато увеличивалась за счет увеличения напряжения источника питания, а напряженность приложенного магнитного поля измерялась с помощью поперечного датчика Холла Херста. Соответствующие отклонения по длине (т. Е. Параллельно приложенному полю) регистрировались с помощью лазерного сканирующего экстензометра (модель: Beta Lasermike, AS1000; разрешение ± 1 мкм). Были протестированы четыре образца. Примечание: магнит, используемый для магнитомеханического приведения в действие засеянных ячейками сетей, нельзя было использовать для экспериментов по отклонению, так как он не позволял размещать приемник и передатчик экстензометра вдали от магнитных полюсных наконечников, тем самым влияя на лазерный экстензометр. чтения.В результате отклонения сети можно было измерить только при величинах до 0,7 Тесла (вместо 1,1 Тесла), что было максимальным полем, которое мог достичь этот магнит.

2,8. Статистический анализ

Результаты выражены как среднее значение ± стандартная ошибка трех независимых экспериментов (n = 3). Различия между активированными и не задействованными группами определяли с помощью непарного t-теста с использованием Prism 8 ^® , Graph-Pad Software Inc (Сан-Диего, Калифорния, США). Порог статистической значимости был установлен на уровне p <0.05.

4. Обсуждение

Цель этого исследования — определить, может ли магнитоактивный слой, который может быть включен в проксимальную область имплантата, опосредовать остеогенез in vitro. Слой состоит из взаимосвязанной сети тонких ферромагнитных волокон, которые могут приводиться в действие in vivo путем приложения внешнего магнитного поля (клинической величины), вызывающего упругую деформацию сети, прикладывая напряжения к растущим клеткам. Деформации этого типа анализировались ранее [10] с помощью аналитической модели, основанной на прогибе одиночного ферромагнитного волокна в магнитном поле.На рисунке 1b показано относительное изменение длины сетей в зависимости от приложенного магнитного поля с максимальным значением 0,7 Тл. Скорость увеличения деформации изменяется линейно в зависимости от приложенного поля, что согласуется с прогнозируемыми изменениями формы (дополнительный раздел). Он также показывает, что если деформации будут следовать тенденции, показанной на рисунке 1b, изменения длины примерно на 0,1% могут быть произведены с использованием этой конкретной оптоволоконной сети для магнитного поля 1,1 Тесла. Однако значительно более высокие деформации могут быть созданы при использовании сетей с более высоким соотношением сторон волокон (сегментов) (расстояние между стыками L / диаметр волокна D), а также путем увеличения величины наложенного магнитного поля B.Стратегия активации, использованная в этой работе, включала статическую культуру эмбриональных остеобластов человека, засеянных на 444 ферритных сетей из нержавеющей стали в течение недели, чтобы позволить человеческим остеобластам заселять сетевые межволоконные пространства, с последующей двухнедельной ежедневной активацией с использованием внешнего магнитного поля. поле, изменяющееся синусоидально в пределах 0,3–1,1 тесла при 0,2 Гц в течение 5 часов. В исследовании также использовались сети 316L с той же пористостью, но с разной геометрией и размером волокна (раздел 2.1). Из-за этих различий они были включены в качестве контрольной группы, а не экспериментальной группы, чтобы исследовать любое прямое воздействие магнитного поля на клетки.На 2-й день культивирования сети культивировали в присутствии остеогенных добавок (дексаметазон и β-глицерофосфат). Иммунофлуоресцентное окрашивание на 16-й и 21-й дни (рис. 3) показало заметный рост клеток в межволоконных пространствах, поскольку клетки были способны мигрировать или растягиваться дальше от волокон и распространяться по межволоконным промежуткам как в статических, так и в задействованных сетях 444. На 21 день клетки заселили межволоконные пространства по всей сети волокон. Процесс минерализации и выработка внеклеточного матрикса (ЕСМ) в культуре остеогенных клеток можно определить по образованию минерализованных узелков, состоящих из неорганического гидроксиапатита и органических компонентов. включая коллаген I типа [46].В этом исследовании было проведено два дополнительных анализа. OsteoImage ^TM анализ минерализации (рис. 4), который связывается с минеральным компонентом костеподобных узелков, откладываемых клетками, и окрашивание ализарином красным, которое определяет накопление кальция и образование хелатов (рис. 5) [47]. Оба анализа показали, что механическое воздействие стимулировало минерализацию и производство ЕСМ, о чем свидетельствует повышенное количество костноподобного минерала по сравнению со статическими сетками 444 (p23). Никаких различий между задействованными сетками 316L не наблюдалось по сравнению с сетями 316L, культивированными в статических условиях (p > 0.3). Эти данные подтверждаются повышающей регуляцией COL1A1 в 2,5 раза (pFigure 6a, для 444 активированной группы по сравнению с 444 статической группой. COL1A1 является основным компонентом костного ECM [48]. Он может опосредовать адгезию клеток, вносить свой вклад в фенотип зрелого остеобласта и обеспечивает матрицу для минерализации [49]. Чтобы дополнительно проанализировать влияние магнитомеханического воздействия на остеогенную способность остеобластов, используются маркеры образования кости, такие как ALP и OCN, а также Runx2, BMP-2 и VEGF, которые имеют известные функции в биологии костей, были оценены (Рисунок 6 и Рисунок 7).OCN является вторым по распространенности белком в кости после коллагена, который может быть обнаружен в полностью минерализованном матриксе (поздние маркеры дифференцировки остеобластов) и способствует отложению минерального вещества [50]. ЩФ представляет собой эктофермент, высоко экспрессируемый в активных остеобластах [46] и играет роль в минерализации костей, контролируя концентрацию ингибиторов минерализации и ионов фосфата. В этом исследовании, как ALP (3,2-кратный (pOCN (уровень гена: 3-кратный (pp51,52,53)), сообщали о повышении регуляции вышеуказанных маркеров на уровне как гена, так и белка при применении механической стимуляции и ранее были связаны со связыванием кальция и процессом минерализации костного матрикса.Runx2 является важным фактором транскрипции для дифференцировки остеобластов и формирования костей и непосредственно регулирует экспрессию OCN [54]. Кроме того, мутации Runx2 у людей, которые снижают уровень функциональной активности этого гена, ответственны за кледокраниальную дисплазию [55]. В этом исследовании механическое воздействие увеличивало экспрессию Runx2 в 2,2 раза (p34,56,57), что продемонстрировало активацию Runx2 в результате механической стимуляции, такой как циклическое сжатие (5 и 10% деформации) и растяжение (1%). .BMP-2 накапливается в ECM и, как было показано, стимулирует дифференцировку остеобластов in vitro [58]. Он проявляет это остеогенное действие, регулируя транскрипцию остеогенных генов, таких как ALP, COL1A1 и OCN. Более того, BMP-2, как известно, контролирует экспрессию и функции Runx2 [54]. Например, остеобласты, культивированные на волоконных сетях поликапролактона (PCL), показали повышенную регуляцию BMP-2 (17 раз), Runx2 (1,6 раза), ALP (2,5 раза), COL1A1 (2,2 раза) и OCN (3,4 раза). -fold) по сравнению со статическими сетками, когда каркасы после 4 недель культивирования подвергались 10% циклической сжимающей деформации при 0.5 Гц в течение 4 часов [57]. VEGF является основным ангиогенным фактором роста, участвующим в заживлении костей, и играет важную роль в восстановлении костей, стимулируя остеобласты [46,59]. Сообщалось о синергизме между BMP-2 и VEGF [60], в котором существует тесная связь с развитием и заживлением костей, что является преимуществом для процедур регенерации костей. В настоящем исследовании BMP-2 активировался в четыре раза, в то время как магнитное воздействие увеличивало экспрессию VEGF в 2,9 раза (концентрация pBMP-2 измерялась по сравнению со статическими сетями (pMagneto-механическое воздействие 316L (немагнитное)) Networks показали аналогичное отложение костноподобных минералов, экспрессию генов и высвобождение белка в супернатанте по сравнению с теми, которые культивировались без активации, что позволяет предположить, что магнитное поле не оказывает прямого влияния на клеточные ответы.Эффекты, наблюдаемые в клетках в 444 (магнитных) сетях, можно отнести к механическим деформациям, индуцированным в растущих клетках посредством магнитомеханического воздействия на сети волокон. В течение первых недель культивирования клетки образуют мосты между соединяющими волокнами, а затем начинают формировать скопления клеточного матрикса в углах межволоконных пространств, где два волокна встречаются за счет роста ткани, вызванного кривизной, как ранее описано для остеобластов мыши MC3T3-E1. [61]. Клетки связаны друг с другом или с ЕСМ и, таким образом, прямо или косвенно связаны с волокнами.В ответ на приложение магнитного поля сети упруго деформируются, передавая напряжения и деформации растущим клеткам через небольшие локальные отклонения волокон. Деформация волоконных сетей также вызовет поток жидкости внутри сетей, создающий напряжения сдвига (тангенциальные силы трения, возникающие, когда жидкость течет по поверхности ячейки). Чтобы вызвать изменения в поведении клеток и отложении матрикса, эти силы должны быть преобразованы в биохимические реакции, действуя через механочувствительные молекулы внутри фокальных адгезионных комплексов, ионных каналов и цитоскелета [62].

Таким образом, результаты этого исследования показывают, что механическое воздействие увеличивает экспрессию генов, важных для дифференцировки остеобластов (Runx2, BMP-2), отложения матрикса и минерализации (COL1A1, ALP, OCN) и васкуляризации (VEGF). Было сопутствующее увеличение количества BMP-2 и остеокальцина, продуцируемых клетками, и усиленное отложение минерализованного матрикса. Эти результаты демонстрируют, что штаммы, возникающие во время магнитомеханического воздействия на сети ферромагнитных волокон, могут увеличивать остеогенную дифференцировку остеобластов человека, растущих внутри сетей, in vitro.Дальнейшая работа будет сосредоточена на влиянии этого срабатывания на самосборку эндотелиальных клеток и поддерживающих популяций клеток (например, остеобластов) в сосудоподобные структуры, что важно для формирования кости.

5. Выводы

В этом исследовании магнитомеханическое срабатывание было исследовано как средство стимулирования остеогенеза in vitro в высокопористых ферромагнитных волоконных сетях путем изучения минерализации, продукции ECM и результирующей экспрессии генов, белков и факторов транскрипции. известно, что он необходим для остеогенной дифференциации и функционального созревания.Мы показали, что активация может усиливать минерализацию, продукцию ECM и активировать остеогенез за счет индукции экспрессии OCN, ALP, COL1A1, Runx2 и BMP-2 и приводить к синтезу белков, участвующих в дифференцировке остеобластов и отложении минерализованного матрикса. Кроме того, активация увеличивала экспрессию гена проангиогенной молекулы VEGF. Напротив, немагнитные каркасы не показали значительных эффектов в ответ на магнитомеханическое воздействие по сравнению с соответствующими статическими регуляторами, что свидетельствует об отсутствии прямого воздействия магнитного поля на клеточные ответы.Результаты подтверждают, что контролируемые изменения формы, достигаемые посредством приложения внешнего магнитного поля к ферромагнитному волокнистому каркасу, могут быть использованы для изменения клеточного поведения. Эта концепция может быть использована при разработке биомедицинских устройств с возможностью контролируемого срабатывания in vivo.

Ловушки и проблемы неоднородности

связанные с модуляцией сердечно-сосудистой системы, связанной с иглоукалыванием

ответов. J Appl Physiol 2005; 98: 872–880.

37.Ланжевен Х.М., Черчилль Д.Л., Ву Дж. И др. Свидетельства

вовлечения соединительной ткани в иглоукалывание. FASEB J

2002; 16: 872–874.

38. Stener-Victorin E, Jedel E, Janson PO, Sverrisdottir YB.

Низкочастотная электроакупунктура и физические упражнения

снижают активность мышечных симпатических нервов при поли-

синдроме кистозных яичников. Am J Physiol Regul Integr Comp

Physiol 2009; 297: R387–395.

39. Эрнст М., Ли М.Х.Симпатические вазомоторные изменения, вызванные

ручной и электрической акупунктурой точки Хоку

, визуализированы с помощью термографии. Боль 1985; 21: 25–33.

40. Эрнст М., Ли М.Х. Симпатические эффекты ручной и электрической акупунктуры

точки колена Цусанли: сравните

с симпатическими эффектами точки руки Хоку. Exp

Neurol 1986; 94: 1–10.

41. Ceccherelli F, Gagliardi G, Ruzzante L, Giron G. Acu-

пункционная модуляция вызванного капсаицином воспаления:

эффект внутрибрюшинного и местного введения налокса-

one у крыс.Слепое контролируемое исследование. J Альтернативное дополнение —

, Med 2002; 8: 341–349.

42. Kong J, Ma L, Gollub R, et al. Экспериментальное исследование функциональной

магнитно-резонансной томографии головного мозга во время мануальной

и электроакупунктурной стимуляции акупунктурной точки

(LI-4 Hegu) у здоровых субъектов показывает различную активацию мозга

между методами. J. Альтернативное дополнение Med

2002; 8: 411–419.

43. Kong J, Fufa DT, Gerber AJ, et al.Психофизический вывод —

получен в результате рандомизированного пилотного исследования мануального, электрического,

и фиктивного акупунктурного лечения экспериментально вызванной тепловой боли

. Дж. Пейн 2005; 6: 55–64.

44. Нападов В., Макрис Н., Лю Дж. И др. Эффекты электроакупунктуры

по сравнению с мануальной иглоукалыванием на мозг человека

, измеренные с помощью фМРТ. Карта человеческого мозга 2005; 24:

193–205.

45. Иноуэ М., Ходжо Т., Накадзима М. и др. Влияние электрической стимуляции полового нерва

на кровоток по седалищному нерву

у животных.Acupunct Med 2008; 26:

145–148.

46. Йоханссон Дж., Маннера

Ас-Холм Л., Шао Р. и др. Электрическая и

мануальная акупунктурная стимуляция у крыс с синдромом кистозных яичников поли-

: различные эффекты на мышцы и жир

тканевая передача сигналов инсулина. PLoS ONE 2013; 8: e54357.

47. Ланг П.М., Стоер Дж., Шобер Г.М. Пилотное исследование функциональной

магнитно-резонансной томографии головного мозга во время мануальной

и двусторонней акупунктурной анальгезии, наблюдаемой с помощью количественного сенсорного тестирования на здоровых добровольцах.Anesth Analg

2010; (110): 1448–156.

48. Zheng Z, Qiang Feng SJ, de Costa C, et al. Иглоукалывание

обезболивание для временного суммирования экспериментальной боли: рандомизированное контролируемое исследование

. Eur J Pain 2010; 14: 725–731.

49. Schliessbach J, van der Klift E, Erendt-Nielsen L, Curatolo

M, Streitberger K. Влияние краткой электрической и ручной

акупунктурной стимуляции на механическую экспериментальную боль.

Pain Med 2011; 12: 268–275.

50. Ямамото Х., Кавада Т., Камия А., Миядзаки С., Суги-

мати М. Вовлечение механорецепторов в сенсорные механизмы

ручной и электрической акупунктуры.

Auton Neurosci 2011; 160: 27–31.

51. Ван Дж.К., Мао Л., Хань Дж. Сравнение ноцицептивных эффектов против

, индуцированных электроакупунктурой, и чрескожной электрической стимуляции нервов

у крыс. Int J

Neurosci 1992; 65: 117–129.

52.Хуанг В., Патч D, Нападоу В. и др. Характеристика

акупунктурных стимулов с использованием изображений мозга с помощью фМРТ. PLoS

ONE 2012; 7: 1–19.

53. Гали Р.Г., Фицпатрик К.Т., Данди Дж. У. Противорвотные исследования

с традиционной китайской акупунктурой. Сравнение

ручного иглоукалывания с электрической стимуляцией и

, обычно использующего противорвотные средства. Анестезия 1987; 42: 1108–1110.

54. Занг Дж. 80 случаев периферического паралича лицевого нерва, пролеченных

иглоукалыванием с неглубоким вибрационным введением.J Trad Chin

Med 1999; 19: 44–47.

55. Bao YH, Feng W., Zhi G, et al. Рандомизированное и сравнительное исследование сосудистой деменции, леченной иглой, оставалось

в точках головы. Ист-Вест Интреграт Мед 2006; 4: 12–17.

56. Фриск Дж., Спец А.С., Хьертберг Х., Петерсон Б., Хаммар М.

Два режима иглоукалывания в качестве лечения приливов у

мужчин с раком простаты — проспективное многоцентровое исследование

с долгосрочным наблюдением -вверх.Eur Urol 2009; 55: 156–163.

57. Фрейре А.О., Сугаи ГКМ, Тогейро С.М., Мелло Л.Е., Туфик С.

Непосредственный эффект иглоукалывания на режим сна

пациентов с синдромом обструктивного апноэ во сне. Acupunct Med.

2010; 28: 115–119.

58. Moon S-K, Whang Y-K, Park S-U и др. Антиспастический эффект

электроакупунктуры и прижигания у больных, перенесших инсульт.

Ам Дж. Чин Мед 2003; 31: 467–474.

59. Zheng X, Meng J-B, Fang Q. Электроакупунктура снижает на

дозу мидазолама, контролируемую биспектральным индексом, у

тяжелобольных пациентов с ИВЛ: экспериментальное исследование ex-

.Acupunct Med 2012; 30: 78–84.

60. Mackenzie I.Z, Xu J, Cusick C, et al. Иглоукалывание для снятия боли

облегчение во время индуцированных родов у первородящих: рандомизированное контролируемое исследование

. BJOG 2011; 118: 440–447.

61. Michalek-Sauberer A, Heinzl H, Sator-Katzenschlager SM,

et al.

Периоперационная ушная электроакупунктура не оказывает влияния на боль и потребление анальгетиков после удаления третьего моляра

. Анест Аналг 2007; 104: 542–547.

62. Там Л.С., Леунг П.К., Ли Т.К., Чжан Л., Ли Е.К. Иглоукалывание в

лечении ревматоидного артрита: двойное слепое контролируемое пилотное исследование

. BMC Complement Altern Med 2007; 7: 35.

63. Тао Ю. Восемьдесят случаев повреждения верхнего ягодичного нерва

, пролеченных электроакупунктурой. J Trad Chin Med

2000; 20: 132–133.

64. Tsui P, Leung MCP. Сравнение эффективности между мануальной иглоукалыванием и электроакупунктурой на

пациентах с теннисным локтем.Acupunct Electrother Res

2002; 27: 107–117.

65. Го Н. Лечение растяжения связок электроакупунктурой. J Trad

Chin Med 2003; 23: 119–120.

66. Sator-Katzenschlager SM, Szeles JC, Scharbert G, et al.

Электрическая стимуляция акупунктурных точек ушной раковины на

более эффективна, чем обычная ручная ушная игла.

пункция при хронической шейной боли: пилотное исследование. Anesth

Analg 2003; 97: 1469–1473.

67.Sator-Katzenschlager SM, Scharbert G, Kozek-Langen-

ecker SA, et al. Краткосрочная и долгосрочная польза от

хронической боли в пояснице с помощью адъювантной электротерапии по сравнению с

ручной иглоукалыванием ушной раковины. Anesth Analg 2004; 98:

1359–1364.

68. Sator-Katzenschlager SM, Wo

¨lfler MM, Kozek-Langeneck-

er SA, et al. Ушная электроакупунктура как дополнительный периоперационный метод обезболивания

при аспирации ооцитов при лечении ЭКО

.Hum Reprod 2006; 21: 2114–2120.

69. Сюэ Б., Фан Л., Ху Л. Клиническое наблюдение шейки матки

спондилопатия вертеброартериального типа, леченная электро-

иглоукалыванием. J Trad Chin Med 2007; 27: 39–42.

MANUAL VS ELECTRICAL ACUPUNCTURE 15

Мультимодальная реабилитация — BioRob — EPFL

Одна из сфер интересов REHAssist — разработка доступных и экономически эффективных методов реабилитации , которые можно легко комбинировать с традиционными методами лечения.Роботизированные устройства с электроприводом не используются, это упрощает внедрение в условиях ограниченного финансирования.

Модальности, рассматриваемые нашей группой, следующие:

• Функциональная электростимуляция
• Тактильная обратная связь и сенсорная замена
• Ошибка увеличения
• ИМТ с использованием ЭЭГ

Проектов

Устройства и устройства

Функциональная электростимуляция

Функциональная электрическая стимуляция поверхности (sFES) при реабилитации нижних конечностей у пациентов с параличом нижних конечностей широко изучалась.Многочисленные исследования показали его положительные эффекты для пациентов с травмой спинного мозга, такие как поддержание или увеличение мышечной массы, повышение нейропластичности, улучшение кровообращения и уменьшение мышечной спастичности.

StimWave — это электростимулятор на заказ, разработанный нашей лабораторией. Вырабатывает до 100 мА простых периодических импульса тока. Частота сигнала регулируется от 10 до 85 Гц, а ширина импульса от 100 до 300 микросекунд.

XStim- Разработано новое поколение функциональной электростимуляции. XStim обеспечивает различные режимы электростимуляции: 1) простая электростимуляция, генерирующая только один программируемый периодический импульс 2) дублет, генерирующий 2 одновременных периодических программируемых импульса и 3) триплет, генерирующий 3 одновременных периодических программируемых импульса. XStim в основном был разработан для носимых приложений.

Электростимулятор 1-канальный

ИМТ с использованием ЭЭГ для расшифровки намерений нижних конечностей

Интерфейсы мозг-машина (ИМТ) на основе электроэнцефалографии (ЭЭГ) были разработаны для декодирования церебральной активности с целью обнаружения двигательной активности и намерений человека. Моторные образы (МИ) — наиболее часто используемые нейронные корреляты для нейрореабилитации.Обычно используемые двигательные намерения представляют собой изображение кинестетических движений 1) левой, соответственно правой руки или обоих 2) движений ступней / ступней. В ИМТ, ориентированном на реабилитацию походки, ИМ нижних конечностей интуитивно понятен, но сложный метод из-за относительно небольшой области мозга, представляющей движения ног. В этой теме наша группа сотрудничает с лабораторией Jose Milan и центром нейрореабилитации AASDAP.

Публикации по теме:

Лю, Донг и др.« Тренажер походки, управляемый мозгом, с визуальной и проприоцептивной обратной связью ». Журнал нейронной инженерии 14,5 (2017).

Лю, Донг и др. « Расшифровка начала движения нижних конечностей на основе ЭЭГ: непрерывная классификация и асинхронное обнаружение. ”IEEE Trans. на Neur. Syst. и Rehab Eng. (2018).

Вибротактильная тактильная обратная связь

Сенсорная замена касается стимуляции одного чувства в попытке имитировать недостающие ощущения другого чувства [Paul Bach-y Rita, 1967].В этом случае тактильный канал используется в качестве альтернативного входного канала для предоставления информации, отсутствующей в поврежденных органах чувств, таких как зрение, слух или пространственная ориентация. Для людей с травмой спинного мозга, потерявших чувствительность в нижних конечностях, мы используем рукава, оснащенные вибротактильными приводами для обратной связи по вибрациям в определенных последовательностях, при ходьбе, фазах поворота и в стойке. Тактильный дисплей может быть интегрирован в различные предметы одежды. В подходящих втулках, используя преимущество упругого сжатия, это может предлагать возможность повторного размещения исполнительных механизмов.Нашивки с застежками-липучками для быстрого наложения и хорошего контроля силы контакта.

Публикации по теме:

Сомон Галло, « Носимые мультимодальные тактильные интерфейсы для усиления тактильного восприятия .», Докторская диссертация, EPFL (2016).

Общий архив | Страница 3 из 6

Декабрь — мой самый напряженный месяц в году, и я даже не очень люблю делать покупки в праздничные дни.(Фактически, я беру на себя обязательство даже не заходить в торговый центр в период между Днем Благодарения и Рождеством.) Но, тем не менее, везде, где я еду, интенсивнее движение, везде растет толпа, увеличивается моя рабочая нагрузка и уменьшается мое терпение.

Сезон отпусков может быть таким же — если не большим — стрессом для наших питомцев. Помимо того, что люди испытывают стресс, во время отпуска обычно происходят изменения в их распорядке дня, что может вызвать беспокойство у домашних животных. Кошки, в частности, люди привычки и преуспевают в постоянстве.

Хотя мои собаки, Санчес и Джина, не знают, что сейчас декабрь, я уверен, что они чувствуют мое напряжение. Как собачий музыкальный эксперт, я научился снимать стресс с помощью музыки. Я разработал музыку Through a Dog’s Ear — клинически протестированную музыку, которая успокаивает тысячи собак по всему миру, а также снимает тревогу — тревогу разлуки, звуковые фобии, страх, чрезмерный лай и т. Д. Музыкальная серия Calm your Canine Companion клинически доказано, что успокаивает нервную систему собак.Это звуковая терапия для собак!

Как люди, мы можем пить зеленый чай, заниматься йогой, медитировать и читать вдохновляющие материалы, чтобы сбалансировать нашу нервную систему. Но наши домашние животные зависят от нас, чтобы обеспечить им мирную среду, так как это может влиять на их здоровье и поведение.

Музыкальная терапия для собак может помочь обеспечить этот баланс. Уже доказано, что классическая музыка успокаивает собак. Специально аранжированные классические композиции на записях Through a Dog’s Ear помогают успокоить нервную систему собаки с помощью тона, темпа и рисунка.

1. Тон — более низкие частоты успокаивают нервную систему собак (и человека). Фортепианные аранжировки часто играют ниже, чем написано изначально.
2. Tempo — Композиции были значительно замедлены до 40-60 ударов в минуту (ударов в минуту), заставляя собак увлекаться музыкой. Из-за естественного процесса вовлечения сердцебиение, дыхание и мозговые волны замедляются, чтобы соответствовать внешнему периодическому ритму.
3. Pattern — сложные шаблоны, которые вдохновляют на активное слушание, удалены, а шаблоны упрощены.Слушатель находится в режиме пассивного слушания (а не активного слушания), а методы пассивного слушания способствуют расслаблению.

И, честно говоря, это успокаивает не только собак (и во многих случаях кошек). Он одинаково расслабляет и приносит удовольствие людям, о чем свидетельствуют комментарии, которые я получил от людей, которые использовали его для снятия стресса у своих животных.

Мне как соучредителю Через собачье ухо и пианисту в серии компакт-дисков согревает то, что музыка улучшает жизнь собак и их людей во всем мире.Не менее приятно и то, что люди становятся более внимательными к звуку, наблюдая за реакцией своего питомца на музыку. Звук — это мощная энергия, которую нельзя принимать как должное — он оказывает глубокое воздействие на все виды.

Помимо слухового прохода, мы можем воспитать все их чувства с помощью натуральных успокаивающих средств и техник. На рынке есть прекрасные средства ароматерапии, успокаивающие людей и их домашних животных. Я лично использую ароматерапевтические спреи Comfort и Calming от The Scent Project, созданные Нэнси Таннер, сертифицированным профессиональным дрессировщиком собак.Восхитительные распылители тумана хорошо работают в ящиках, на собачьих подстилках и в доме, чтобы вы тоже могли им насладиться.

Кроме того, выделите дополнительное время во время отпуска, чтобы просто позволить собакам нюхать и учуять запахи на улице. Выгул собак для физических упражнений, конечно, всегда полезен. Но иногда позволять им быть спокойными и принюхиваться к тому, что их душе угодно, для них очень успокаивает и радует. Санчес восстанавливается после травмы — хотя его физические возможности временно ограничены, его нос отлично тренируется.И хотя он все больше времени нюхает, я испытываю большее чувство спокойствия и неподвижности на другом конце поводка.

Электростимуляция — секс-игрушки доктора Дика Отзывы

Джина и Кевин знакомят нас с трубчатым базовым кольцевым электродом PES и электродом для стимуляции простаты PES .

PES Кольцевой электрод с трубчатым основанием (C086) $ 70,00

Электрод для стимуляции простаты PES (C092) $ 133.00

Джина : «Когда мы с Кевином встретились, я была как эта хорошая маленькая католичка. Столь же сексуально авантюрным, насколько я когда-либо был, я занимался сексом при включенном свете. Я серьезно, должно быть, я был настоящим профессионалом ».
Кевин : «Да, это было похоже на то, что она только что сбежала из монастыря или чего-то такого. Она была совершенно очаровательна с этим потрясающим телом, но она была такой робкой, застенчивой и совершенно неопытной ».
Джина : «Но посмотри на меня сейчас! Благодаря Кевину и нашему коварному доктору Дику я вошел в контакт со своим внутренним «Домом».Несмотря на мои феминистские наклонности, я думала, что в спальне женщины всегда подчиняются мужчинам. Я никогда не подозревал, что существуют «подпольщики». И любой, кто не знал Кевина и моего маленького секрета, никогда не догадается, что он любит, когда над ним доминируют. То есть для меня это стало огромным сюрпризом ».
Кевин : «Это правда. До той судьбоносной первой проверки я делал это в составе группы проверки доктора Дика. Я никогда не был новичком, у меня был внутренний «Саб», который просто умирает от желания выбраться. Я просто думал, что мне нравятся вещи в моей заднице ».
Джина : «В этом сексе гораздо больше, чем кажется на первый взгляд, да? Я так благодарен за возможность пробудиться в эротическом мире вокруг меня.
Кевин : «Итак, у нас есть два электрода, о которых стоит вам рассказать. Трубчатое базовое кольцо очень похоже на то, что использовали Гленн и Хэнк, только оно больше и подходит к основанию вашего члена. Он предназначен для интенсивной стимуляции всего вашего члена и таза. Поскольку он однополярный, вам придется использовать его в сочетании с другим электродом. Я понял? »
Джина : «Честно говоря, мы тоже не сразу поняли. Мы оба обнаружили, что однополюсный электрод, такой как трубчатое базовое кольцо, должен использоваться вместе с другим однополюсным электродом для завершения эротической электрической цепи.
Кевин : «Разве она не похожа на Сьюзи Сайентист?»
Джина : «Заткнись!»
Кевин : «К счастью, у нас был еще один электрод, Стимулятор простаты (ммммм, стимуляция простаты) для использования с базовым кольцом».
Джина : «Да, я имею в виду, как ему повезло, задница?»
Кевин : «Кстати, трубчатое кольцо можно обрезать по размеру, чтобы обеспечить более индивидуальную подгонку. Стимулятор простаты, с другой стороны, состоит из двух основных компонентов: гибкого Т-образного стержня с хромированной электропроводящей сферой на конце.
Джина: «Гибкость — вот что делает эту вещь такой особенной. Он фокусирует электростимуляцию именно там, где вы этого хотите ».
Кевин : «Вы можете согнуть вертикальный гибкий вал так, чтобы он ударял токопроводящей сферой о точку P. Поверьте мне, это чертовски уверенно даст вам кончил без помощи рук ».
Джина : «На этот раз я действительно увлеклась этим электронным стимулятором. Признаюсь, в прошлый раз я был слишком обеспокоен всем этим ».
Кевин : «Да, на этот раз она действительно увлеклась этим.Ее внутренний «Дом» взял верх. Она даже одела часть — черные чулки и шпильки лечит. Она приковала меня обеими руками и ногами к матрасу (спасибо Sportsheets!) И дразнила меня своим ремнем. Я подарил ей одну на нашу годовщину.
Джина : «Разве он не романтик?»
Кевин : «Я был беспомощен, поэтому ей пришлось смазать меня и установить электроды и провода».
Джина : «Я использовала латексные перчатки, не беспокойтесь. Между прочим, я обнаружил, что латексные перчатки издают приятный звук, когда вы хлопаете плохого парня по голой заднице.
Кевин : «Разве ОНА не романтик? О, SNAP! »
Джина : «Я начала действительно выходить из себя на той власти, которую я имела над ним. Раньше я никогда не чувствовал ничего подобного. Это забавно, потому что я, казалось, с самого начала точно знал, что делать. По сути, я сделал то же, что Гленн сделал с Хэнком, всю эту штуку с окантовкой, хотя я не знал, что это называется окантовкой.
Кевин : «Она дразнила меня соком. Она начала очень медленно, даже слишком медленно.Я сказал ей, что она должна перевернуть эту чертову штуку; Я почти не чувствовал этого. Она очень хорошо ударила меня по заднице и сказала, чтобы я молчала, потому что теперь она была главной ».
Джина : «Мне понравилось. Я даже немного увеличил мощность, чтобы доказать свою точку зрения. Шок заставил его встать и принять к сведению, как в прямом, так и в переносном смысле ».
Кевин : «Мне кажется, я создал монстра».
Джина : «Тебе это нравится. Так что я продолжал в том же духе, пока настраивал на себе вибрацию от страпона.Чем больше Кевин корчился в экстазе и чем больше он рассказывал мне грязные вещи, которые он хотел, чтобы я с ним делал, тем ближе я подходил к тому, чтобы кончать на себя ».
Кевин : «Это была самая интенсивная стимуляция простаты, которую я когда-либо чувствовал. И поскольку ощущения были вверх и вниз по моему члену одновременно, я с трудом выдерживал это ».
Джина : «Мы чудом пришли в одно и то же время, чего никогда не бывает».
Кевин : «Я знаю; и я даже не прикасался к своему члену или к Джине, если на то пошло.Как будто между нами проходила дикая сексуальная энергия ».
Джина : «Мы оба рекомендуем эротическую электростимуляцию всем, кто хочет чего-то необычного».
Кевин : «И вы можете процитировать нас по этому поводу».

The Review Crew хочет напомнить всем о важности смазки при игре с EES. И убедитесь, что это смазка на водной основе. Настоятельно рекомендуется побрить участки, где будут размещены электроды.

Очистить тоже относительно легко.Большинство электродов можно очистить несколькими каплями жидкости для мытья посуды и мягким безворсовым полотенцем. Их также можно продезинфицировать с помощью 10% раствора отбеливателя. Но НИКОГДА НЕ ЗАМАЧИВАЙТЕ электроды. Вы также можете обработать электроды изопропиловым спиртом перед сушкой и хранением.

В заключение мы хотим сказать, что веб-сайт PES был важным ресурсом для всех нас до того, как мы начали нашу игру, а также помог нам понять, как работает эротическая электростимуляция. Мы также рекомендуем вам посетить их веб-сайт.Он полон очень полезных и информативных материалов. У них есть галереи, советы по безопасности, информация о продуктах, множество ссылок и даже фантастическая доска обсуждений, где вы можете общаться с другими знатоками EES.

НАСЛАЖДАЙТЕСЬ

стоковых фотографий дождливой ночи на парковке в торговом центре, ряды припаркованных автомобилей, крупным планом, вид с уровня 52644 1966 — Bluacs

Я просматриваю онлайн более 3 часов сегодня,
, но я не нашел ни одной интересной статьи, подобной вашей.Для меня это того стоит.
На мой взгляд, если все владельцы веб-сайтов и блоггеры будут делать качественный контент
, как это делали вы, Интернет будет намного полезнее, чем когда-либо прежде.

Мне очень приятно открыть для себя эту страницу. Я должен поблагодарить вас за
раз за это особенно замечательное чтение !!
Мне определенно понравилось все, и я также добавил в закладки, чтобы увидеть что-то новое в своем блоге.

Могу я просто сказать, как приятно обнаружить кого-то, кто действительно понимает, о чем они обсуждают
в сети.Вы, конечно, понимаете, как выявить проблему
и сделать ее важной.
должны это проверить и понять эту сторону вашей истории. Не могу поверить, что вы не более популярны, потому что у вас наверняка есть этот дар.

Хороший пост в блоге. Мне определенно нравится этот сайт.
Придерживайтесь этого!

Трудно найти хорошо осведомленных людей в этой конкретной теме, но похоже, что вы знаете, о чем говорите!
Спасибо

Вам необходимо принять участие в конкурсе на один из
блогов самого высокого качества в сети.Я обязательно буду рекомендовать этот сайт!

Однозначно стоит прокомментировать увлекательное обсуждение.

Я действительно думаю, что вам нужно публиковать больше по этой теме, возможно, это не табу, но обычно люди не говорят о
о таких вопросах. К следующему! Всего наилучшего!!

Здравствуйте! Я просто хочу поблагодарить вас за отличную информацию, которую вы собрали в этом посте.

Я вернусь на ваш сайт в ближайшее время.

Когда я изначально комментировал, я, кажется, нажал
на поле «Уведомлять меня, когда добавляются новые комментарии», и теперь всякий раз, когда добавляется комментарий
, я получаю 4 письма с таким же комментарием.

Должен быть способ удалить меня из этой службы?

Большое спасибо!

В следующий раз, когда я читаю блог, надеюсь, он не подведет меня так же
, как этот. То есть, да, это был мой выбор, чтобы прочитать, тем не менее, я искренне думал, что у вас, вероятно, будет что-то полезное, о чем можно будет поговорить.
Все, что я слышу, это плач из-за того, что вы могли бы исправить, если бы вы
не были слишком заняты поисками внимания.

Я искренне верю, что
этому сайту нужно уделять гораздо больше внимания.Я, наверное, еще вернусь, чтобы прочитать больше, спасибо за совет!

Ты такой интересный! Я не верю, что действительно читал что-то вроде этого
раньше. Так замечательно найти кого-то с искренними мыслями по этому поводу
. На самом деле … большое спасибо за то, что запустили это.

Этот сайт — то, что требуется в Интернете, кто-то с немного оригинальности
!

Я люблю читать статьи, которые могут заставить людей задуматься.
Кроме того, спасибо за то, что позволили мне прокомментировать!

Это идеальный сайт для всех, кто хочет узнать об этой теме.

Вы так понимаете, что с вами почти сложно спорить (не то чтобы мне,
, лично нужно было… Ха-ха). Вы определенно по-новому взглянете на тему, о которой писали целую вечность.

Отличный материал, просто отлично!

Ой, это был действительно хороший пост. Находя время и реальные усилия, чтобы выпустить
отличную статью… но что я могу сказать… Я много откладываю дела и, кажется, никогда ничего не добиваюсь.

Должен сказать, я впечатлен. Я редко встречаю блог, который был бы столь же познавательным и забавным, и, без сомнения,
попал в самую точку.Проблема — это проблема, о которой мало кто говорит разумно.
Теперь я очень счастлив, что наткнулся на это, когда искал что-то по этому поводу.

О боже мой! Классная статья, чувак! Большое спасибо,
Однако у меня возникли проблемы с вашим RSS. Я не знаю, почему я
не могу подписаться на него. Есть ли у кого-нибудь похожие проблемы с RSS?

Любой, кто знает ответ, любезно ответит?

Спасибо !!

Выдающаяся акция! Я только что отправил этот номер
своему коллеге, который выполнял небольшую домашнюю работу по этому поводу.
И он на самом деле купил мне завтрак, потому что я нашла его за
его… лол. Так что позвольте мне перефразировать это…. Спасибо за еду !!
Но да, спасибо, что потратили время, чтобы поговорить об этом
здесь, на своем веб-сайте.

После изучения нескольких статей на вашей веб-странице я действительно ценю ваш способ ведения блога.
Я сохранил его в своем списке сайтов с закладками и в ближайшее время проверю его еще раз.
Загляните и на мой сайт и поделитесь своим мнением.

На этой странице действительно есть вся информация и
фактов, которые мне были нужны по этой теме, и я не знал, у кого спросить.

Определенно нужно много узнать об этой теме.
Мне нравятся все твои замечания.

Вы сделали здесь несколько хороших выводов. Я проверил в Интернете дополнительную информацию о проблеме и обнаружил, что большинство людей согласятся с вашими взглядами на этом веб-сайте.

Хороший пост. Я узнаю что-то совершенно новое и интересное на сайтах, на которые натыкаюсь каждый день.
Всегда полезно прочитать содержание
других авторов и использовать кое-что с
их веб-сайтов.

Я часто веду блог и искренне ценю ваш контент.

Эта статья действительно вызвала у меня интерес. Я добавлю ваш сайт в закладки и буду проверять наличие новой информации примерно раз в неделю.
Я тоже подписался на ваш канал.

Довольно! Это был невероятно замечательный пост. Благодарим
за предоставление этой информации.

Привет! Очень полезный совет в этой статье!
Это небольшие изменения, которые принесут наибольшие изменения.
Спасибо, что поделились!

Привет! Эта статья не могла быть лучше!

Читая этот пост, я вспоминаю моего предыдущего соседа по комнате!
Он все время говорил об этом.Я передам ему эту информацию.
Совершенно уверен, что он очень хорошо прочитает. Спасибо, что поделились!

Привет! Нет сомнений в том, что на вашем веб-сайте могут быть проблемы с совместимостью с интернет-браузером
. Всякий раз, когда я смотрю
на ваш веб-сайт в Safari, он выглядит нормально, однако при открытии в IE он имеет некоторые перекрывающиеся проблемы с
. Я просто хотел предупредить вас! Кроме того, фантастический блог!

Прочитав это, я подумал, что это действительно поучительно.
Спасибо, что нашли время и энергию, чтобы написать эту статью.

Я снова обнаружил, что лично провожу значительное количество времени как на чтение, так и на комментарии.
Но что ж, оно того стоило!

Привет! Я мог бы поклясться, что уже посещал этот веб-сайт
раньше, но, прочитав несколько статей, я понял, что для меня это в новинку.
Как бы то ни было, я определенно счастлив, что наткнулся на него, буду добавлять его в закладки и часто проверять!

Мне нужно поблагодарить вас за это фантастическое чтение !!
Я, конечно, наслаждался каждым кусочком.Я сохранил вас как избранный
, чтобы вы могли просматривать новые публикации…

Привет, я считаю, что это отличный блог. Я наткнулся на него
😉 Я вернусь еще раз, так как я сохранил его в качестве избранного.

Деньги и свобода — лучший способ измениться, будьте богаты
и продолжайте помогать другим людям.

Ваш стиль действительно уникален по сравнению с другими людьми, у которых я читал материал
. Спасибо за сообщение, когда у вас будет возможность. Думаю, я просто добавлю эту страницу в закладки.

Мне удалось найти хороший совет из ваших сообщений в блоге.

Отличная статья! Мы даем ссылку на эту особенно замечательную статью на нашем сайте.
Продолжайте в том же духе.

Это отличный совет, особенно для новичков в блогосфере.
Простая, но очень точная информация… Спасибо, что поделились ею.
Должен прочитать пост!

Не удержался от комментариев. Хорошо написанный!

Сохранено как избранное, мне очень нравится ваш блог!

Очень хорошая статья.Я тоже сталкиваюсь со многими из этих проблем
.

---